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Potassium phosphate monobasic

磷酸二氢钾

Company: Sigma-Aldrich
Catalog#: P5655
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Company-protocol()
Other protocol()

Electrophysiological Recordings of Evoked End-Plate Potential on Murine Neuro-muscular Synapse Preparations
Author:
Date:
2018-04-20
[Abstract]  Neuromuscular junction (NMJ) is the specialized chemical synapse that mediates the transmission of the electrical impulse running along motor neuron axons to skeletal muscle fibers. NMJ is the best characterized chemical synapse and its study along many years of research has provided most of the general knowledge of synapse development, structure and functionality.

Electrophysiology is the most accurate experimental procedure to study NMJ physiology and it largely contributed to the elucidation of synaptic transmission basic principles. Many electrophysiological techniques have been developed to study NMJ physiology and physiopathology. In this paper, we describe an ex vivo tissue preparation for electrophysiology that can be applied to investigate nerve-muscle ...
[摘要]  神经肌肉接头(NMM)是一种特殊的化学突触,它介导沿着运动神经元轴突运行的电脉冲传输到骨骼肌纤维。 NMJ是最具特色的化学突触,经过多年研究的研究提供了突触发育,结构和功能的大部分常识。

电生理学是研究NMJ生理学的最准确的实验程序,并且主要有助于阐明突触传递基本原理。已经开发了许多电生理学技术来研究NMJ生理学和病理生理学。在本文中,我们描述了一种可应用于研究小鼠神经 - 肌肉传递功能的电生理学组织制备方法。它在我们的实验室常规用于研究突触前神经毒素,抗毒素,并监测NMJ变性和再生。这是一种广泛适用的技术,也可用于研究神经肌肉疾病(包括外周神经病,运动神经元病和肌无力综合征)小鼠模型中NMJ活性的改变。

【背景】神经传递是神经元以快速时间尺度(通常<1毫秒)将信息传递给靶细胞的生理过程。介导这种交流的结构是突触,即神经元(前突触后神经元)或神经元(突触前神经元)和效应细胞(突触后细胞)之间形成的专门结构。神经肌肉接头(nmj)是使运动神经元和骨骼肌纤维之间能够交流的化学突触。这是最好的特征性突触,大部分关于突触的成熟,结构和功能的知识来源于其研究(li et="" al。,2016)。在nmj,沿着运动轴突运动的动作电位侵入神经末梢(突触前布顿)并诱导电压门控钙通道的开放。随后突触前神经末梢中的ca="" 2+流入触发(大约0.3μsec(kuffler等,1984))与约100个突触囊泡的突触前膜融合从准备释放池(占所有囊泡的10-20%)(del="" castillo和katz,1954;="" denker和rizzoli,2010)。每个囊泡约1000个乙酰胆碱(ach)分子在突触间隙中扩散(kuffler和yoshikami,1975),并且在大约0.5毫秒内与突触后肌纤维膜上的烟碱ach受体(nachr)结合。="" nachr是离子型配体门控na="" +="" k="" +="" +通道,它们在ach结合后开放,并通过介导大的突触后膜(端板)引起局部去极化潜力na="" +的向内通量(以及k="" +的较小向外流量)。这种局部去极化被称为诱发终板电位(eepp)(或诱发连接电位)。在小鼠中,骨骼肌纤维的静息膜电位约为-75mv,eepp的幅度约为15-30mv(取决于肌肉类型)。当eepp幅度足够高以达到或克服动作电位阈值时,电压门控na="" +="" +通道打开,从而触发动作电位进入肌肉纤维,其最终沿着肌纤维蔓延并侵入肌纤维t管。在这里,一个激发="" -="" 收缩分子机器将这个电信号转导成肌质网ca2=""> ...

Isolation and Maintenance of Striatal Neurons
Author:
Date:
2018-04-20
[Abstract]  Primary cultures of murine striatal neurons are widely used to explore cellular mechanisms in neurobiology, including brain diseases. Here we describe a detailed and standardized protocol to dissect and culture embryonic murine striatal neurons GABA-positive/DARPP-32-positive for 12 days in vitro, when they show good neuronal cell connectivity and the presence of dendritic spines, which reflects the maturation of the network. [摘要]  小鼠纹状体神经元的原代培养物被广泛用于探索神经生物学中的细胞机制,包括脑部疾病。 在这里,我们描述了一个详细和标准化的协议解剖和文化胚胎小鼠纹状体神经元GABA阳性/ DARPP-32阳性12天体外,当他们显示良好的神经元细胞连接性和存在的树突 刺,反映了网络的成熟。

【背景】纹状体是运动和奖励系统的重要组成部分,纹状体神经元的功能障碍可导致各种神经元疾病,从强迫性行为(Welch et al。,2007)到神经退行性疾病,如在亨廷顿病中观察到的(Reiner等,1988)。因此,一个良好建立的纹状体文化可能是一个很有价值的研究这些和其他条件的模型。成年纹状体中的主要神经元亚型是中型多刺投射神经元(MSNs),其占所有纹状体神经元的约95%并使用抑制性递质γ-氨基丁酸(GABA)。它们具有中等大小的细胞体,复杂的树突状乔木和高密度的树突棘,可同时接受谷氨酸能和多巴胺输入。其余5%的神经元由GABA能神经间神经元组成(Graveland和DiFiglia,1985; ...

Tracking Lipid Transfer by Fatty Acid Isotopolog Profiling from Host Plants to Arbuscular Mycorrhiza Fungi
Author:
Date:
2018-04-05
[Abstract]  Lipid transfer from host plants to arbuscular mycorrhiza fungi was hypothesized for several years because sequenced arbuscular mycorrhiza fungal genomes lack genes encoding cytosolic fatty acid synthase (Wewer et al., 2014; Rich et al., 2017). It was finally shown by two independent experimental approaches (Jiang et al., 2017; Keymer et al., 2017; Luginbuehl et al., 2017). One approach used a technique called isotopolog profiling (Keymer et al., 2017). Isotopologs are molecules, which differ only in their isotopic composition. For isotopolog profiling an organism is fed with a heavy isotope labelled precursor metabolite. Subsequently, the labelled isotopolog composition of metabolic products is analysed via mass spectrometry. The ... [摘要]  因为测序的丛枝菌根真菌基因组缺乏编码胞质脂肪酸合酶的基因(Wewer等人,2014; Rich等人,2014),因此假定脂质从宿主植物转移到丛枝菌根真菌数年。 / em>,2017)。最终通过两种独立的实验方法(Jiang等人,2017; Keymer等人,2017; Luginbuehl等人, ), 2017年)。一种方法使用称为同位素体谱分析的技术(Keymer等人,2017)。同位素体是分子,它们的同位素组成不同。对于同位素生物学分析,生物体被喂以重同位素标记的前体代谢物。随后,通过质谱分析代谢产物的标记同位素组成。检测到的目标代谢物的同位素体模式产生关于代谢途径和通量的信息(Ahmed et al。,2014)。以下协议描述了一个实验装置,该装置能够在由丛枝菌根真菌及其相关真菌胞外菌丝体定植的植物根中分离出脂肪酸的单独同位素分布图,以阐明两种共生生物之间的通量。我们预测,如果两种相互作用的生物体可以物理分离,则该策略还可以用于研究其他生物体之间的代谢物通量。

【背景】丛枝菌根真菌是生物营养生物。因此,它们不能独立栽培,而是依靠与寄主植物的相互作用来维持生命并完成它们的生命周期。这一特征使得研究两种共生生物,特别是单独的真菌具有挑战性。

为了培养,处理和收获与宿主根分开的真菌,开发了2室培养皿系统,并将其用于以前工作中的标记研究(Bécard和Fortin,1988; ...

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