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Potassium phosphate monobasic

磷酸二氢钾

Company: Sigma-Aldrich
Catalog#: P5655
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Company-protocol()
Other protocol()

In vitro Osteoclastogenesis Assays Using Primary Mouse Bone Marrow Cells
Author:
Date:
2018-06-05
[Abstract]  Osteoclasts are a group of bone-absorbing cells to degenerate bone matrix and play pivotal roles in bone growth and homeostasis. The unbalanced induction of osteoclast differentiation (osteoclastogenesis) in pathological conditions, such as osteoporosis, arthritis and skeleton metastasis of cancer, causes great pain, bone fracture, hypercalcemia or even death to patients. In vitro osteoclastogenesis analysis is useful to better understand osteoclast formation in physiological and pathological conditions. Here we summarized an easy-to-follow osteoclastogenesis protocol, which is suitable to evaluate the effect of different factors (cytokines, small molecular chemicals and conditioned medium from cell culture) on osteoclast differentiation using primary murine bone marrow cells. [摘要]  破骨细胞是一组骨吸收细胞,用于退化骨基质并在骨生长和体内平衡中发挥关键作用。 在诸如骨质疏松症,关节炎和癌症骨骼转移等病理状态下破骨细胞分化(破骨细胞生成)的不平衡诱导会导致严重疼痛,骨折,高钙血症或甚至导致患者死亡。 体外破骨细胞生成分析对于更好地理解生理和病理条件下的破骨细胞形成是有用的。 在这里,我们总结了一种易于遵循的破骨细胞生成方案,其适用于评估不同因素(细胞因子,小分子化学物质和来自细胞培养物的条件培养基)对使用原代鼠骨髓细胞的破骨细胞分化的影响。

【背景】骨骼在生命周期内通过连续且良好控制的吸光度和骨量形成来维持。在骨腔中,这两种活性中的每一种都是通过特定的细胞类型进行的:骨形成性成骨细胞和骨降解性破骨细胞。成骨细胞和破骨细胞分别来自骨驻留间充质细胞和造血谱系祖细胞。造血系统骨髓祖细胞分化为成熟破骨细胞主要受核因子-κB配体受体激活因子(RANKL,由TNFSF11编码)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF,由< )来自成骨细胞及其祖细胞(suda et al。 ,1999)。与其他细胞不同,破骨细胞通过融合一定数量的祖细胞而分化(boyle等人,2003)。因此,成熟破骨细胞的关键组织学特征是它们的多个核。成熟后,破骨细胞能够通过产生酸化的微环境来溶解主要由磷酸钙组成的骨质以及蛋白酶以降解细胞外基质(boyle等人,2003),从而能够骨吸收。溶解的骨基质释放成骨细胞使用的隔离生长因子以扩大其人群(kassem和bianco,2015)。成骨细胞和破骨细胞之间的这种相互作用确保了协调的骨形成和 - 退化活性,其在包括骨质疏松症,关节炎和癌症骨转移的过多疾病中失调(rodan和martin,2000; raisz,2005; gupta和massague ,2006)。根据之前的文献(lu等人,2009; wang等人,2014; zhuang等人,2017),在此我们描述使用原代鼠骨髓细胞进行体外破骨细胞发生试验的逐步方案,其允许研究广泛范围的因子/条件(例如细胞因子和条件培养基)对破骨细胞的影响分化。 )来自成骨细胞及其祖细胞(suda="" et="" al。="" ,1999)。与其他细胞不同,破骨细胞通过融合一定数量的祖细胞而分化(boyle等人,2003)。因此,成熟破骨细胞的关键组织学特征是它们的多个核。成熟后,破骨细胞能够通过产生酸化的微环境来溶解主要由磷酸钙组成的骨质以及蛋白酶以降解细胞外基质(boyle等人,2003),从而能够骨吸收。溶解的骨基质释放成骨细胞使用的隔离生长因子以扩大其人群(kassem和bianco,2015)。成骨细胞和破骨细胞之间的这种相互作用确保了协调的骨形成和="" -="" 退化活性,其在包括骨质疏松症,关节炎和癌症骨转移的过多疾病中失调(rodan和martin,2000;="" raisz,2005;="" gupta和massague="" ,2006)。根据之前的文献(lu等人,2009;="" wang等人,2014;=""> ...

Intra-amniotic Injection of Mouse Embryos
Author:
Date:
2018-05-20
[Abstract]  Recent outbreaks of infectious neuro-developmental diseases such as congenital Zika syndrome - have led to a demand for prognosis data from animal models. We developed an intra-amniotic injection mice model that allows Zika virus (ZIKV) infected mice to grow to puberty. In this system, ZIKV is injected into the amniotic fluid of pregnant mice and infected embryos thereafter. ZIKV-infected mice show several symptoms of clinical ‘congenital Zika syndrome’, including decreased brain volume and mis-laminated retina. We also evaluated several behavioral functions of these ZIKV-infected mice, for example, after the mice reach puberty, they have visual and motor defects. This technique can be used to screen and evaluate drug candidates and may help evaluate the prognosis of infectious ... [摘要]  最近爆发的传染性神经发育疾病,例如先天性寨卡综合征 - 已经导致对来自动物模型的预后数据的需求。 我们开发了羊膜内注射小鼠模型,其允许寨卡病毒(ZIKV)感染的小鼠生长至青春期。 在此系统中,ZIKV被注入怀孕小鼠的羊水中,然后感染胚胎。 ZIKV感染的小鼠显示出临床'先天性Zika综合征'的几种症状,包括脑容积减少和视网膜错层。 我们还评估了这些ZIKV感染小鼠的几种行为功能,例如,在小鼠到达青春期后,它们具有视觉和运动缺陷。 这种技术可用于筛选和评估候选药物,并有助于评估感染性神经发育疾病的预后。

【背景】自第一例人感染ZIKV病例以来,已有60多年的历史,但2007年仅记录了14例ZIKV感染的人类病例。 预后数据远远落后于2015年最近爆发的ZIKV。有证据表明小鼠模型可能对预后研究有效,因为之前的报道证明ZIKV在小鼠中的神经毒性。 因此,ZIKV感染的各种方法包括静脉注射,腹腔注射,足垫注射和脑注射已被用于研究胚胎期或婴儿期期间个体的先天性寨卡综合征。 这里给出的羊膜内注射模型具有两个有利的特征。 首先,可以使用野生型小鼠(C57 BL / 6J),并且研究不限于具有免疫缺陷的小鼠。 其次,ZIKV感染的小鼠可长成青春期,这对试图评估预后的研究是有益的。

Electrophysiological Recordings of Evoked End-Plate Potential on Murine Neuro-muscular Synapse Preparations
Author:
Date:
2018-04-20
[Abstract]  Neuromuscular junction (NMJ) is the specialized chemical synapse that mediates the transmission of the electrical impulse running along motor neuron axons to skeletal muscle fibers. NMJ is the best characterized chemical synapse and its study along many years of research has provided most of the general knowledge of synapse development, structure and functionality.

Electrophysiology is the most accurate experimental procedure to study NMJ physiology and it largely contributed to the elucidation of synaptic transmission basic principles. Many electrophysiological techniques have been developed to study NMJ physiology and physiopathology. In this paper, we describe an ex vivo tissue preparation for electrophysiology that can be applied to investigate nerve-muscle ...
[摘要]  神经肌肉接头(NMM)是一种特殊的化学突触,它介导沿着运动神经元轴突运行的电脉冲传输到骨骼肌纤维。 NMJ是最具特色的化学突触,经过多年研究的研究提供了突触发育,结构和功能的大部分常识。

电生理学是研究NMJ生理学的最准确的实验程序,并且主要有助于阐明突触传递基本原理。已经开发了许多电生理学技术来研究NMJ生理学和病理生理学。在本文中,我们描述了一种可应用于研究小鼠神经 - 肌肉传递功能的电生理学组织制备方法。它在我们的实验室常规用于研究突触前神经毒素,抗毒素,并监测NMJ变性和再生。这是一种广泛适用的技术,也可用于研究神经肌肉疾病(包括外周神经病,运动神经元病和肌无力综合征)小鼠模型中NMJ活性的改变。

【背景】神经传递是神经元以快速时间尺度(通常<1毫秒)将信息传递给靶细胞的生理过程。介导这种交流的结构是突触,即神经元(前突触后神经元)或神经元(突触前神经元)和效应细胞(突触后细胞)之间形成的专门结构。神经肌肉接头(nmj)是使运动神经元和骨骼肌纤维之间能够交流的化学突触。这是最好的特征性突触,大部分关于突触的成熟,结构和功能的知识来源于其研究(li et="" al。,2016)。在nmj,沿着运动轴突运动的动作电位侵入神经末梢(突触前布顿)并诱导电压门控钙通道的开放。随后突触前神经末梢中的ca="" 2+流入触发(大约0.3μsec(kuffler等,1984))与约100个突触囊泡的突触前膜融合从准备释放池(占所有囊泡的10-20%)(del="" castillo和katz,1954;="" denker和rizzoli,2010)。每个囊泡约1000个乙酰胆碱(ach)分子在突触间隙中扩散(kuffler和yoshikami,1975),并且在大约0.5毫秒内与突触后肌纤维膜上的烟碱ach受体(nachr)结合。="" nachr是离子型配体门控na="" +="" k="" +="" +通道,它们在ach结合后开放,并通过介导大的突触后膜(端板)引起局部去极化潜力na="" +的向内通量(以及k="" +的较小向外流量)。这种局部去极化被称为诱发终板电位(eepp)(或诱发连接电位)。在小鼠中,骨骼肌纤维的静息膜电位约为-75mv,eepp的幅度约为15-30mv(取决于肌肉类型)。当eepp幅度足够高以达到或克服动作电位阈值时,电压门控na="" +="" +通道打开,从而触发动作电位进入肌肉纤维,其最终沿着肌纤维蔓延并侵入肌纤维t管。在这里,一个激发="" -="" 收缩分子机器将这个电信号转导成肌质网ca2=""> ...

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