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Potassium phosphate monobasic

磷酸二氢钾

Company: Sigma-Aldrich
Catalog#: P5655
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Company-protocol()
Other protocol()

Embryonic Intravitreous Injection in Mouse
Author:
Date:
2018-07-20
[Abstract]  Axons of retinal ganglion cells (RGCs) relay visual information from the retina to lateral geniculate nucleus (LGN) and superior colliculus (SC), which are two major image-forming visual nuclei. Wiring of these retinal projections completes before vision begins. However, there are few studies on retinal axons at embryonic stage due to technical difficulty. We developed a method of embryonic intravitreous injection of dyes in mice to visualize retinal projections to LGN and SC. This study opens up the possibility of understanding early visual circuit wiring in mice embryos. [摘要]  视网膜神经节细胞(RGC)的轴突将视觉信息从视网膜传递到外侧膝状核(LGN)和上丘(SC),这是两个主要的成像视觉核。 在视力开始之前完成这些视网膜投射的布线。 然而,由于技术困难,很少有关于胚胎期视网膜轴突的研究。 我们开发了一种胚胎玻璃体内注射染料的方法,用于观察LGN和SC的视网膜投射。 这项研究开辟了理解小鼠胚胎早期视觉电路布线的可能性。

【背景】早在胚胎第14.5天(E14.5)小鼠中,视网膜轴突开始向LGN和SC投射。 为了研究胚胎中的轴突投射,需要在注射手术前保持胚胎存活至少10小时,玻璃内注射染料。 以前的研究表明,胚胎可以使用含氧小鼠血清进行体外培养。 然而,营养多样性,氧饱和度和温度调节等问题会影响胚胎的生理状况。 在我们的研究中,我们通过胚胎中的子宫壁和眼睑进行玻璃体内注射,并在注射后将它们保存在子宫中。 从E15.5到E18.5很好地标记了对LGN和SC的视网膜轴突投射。

Preparation of Cerebellum Granule Neurons from Mouse or Rat Pups and Evaluation of Clostridial Neurotoxin Activity and Their Inhibitors by Western Blot and Immunohistochemistry
Author:
Date:
2018-07-05
[Abstract]  Cerebellar Granule Neurons (CGN) from post-natal rodents have been widely used as a model to study neuronal development, physiology and pathology. CGN cultured in vitro maintain the same features displayed in vivo by mature cerebellar granule cells, including the development of a dense neuritic network, neuronal activity, neurotransmitter release and the expression of neuronal protein markers. Moreover, CGN represent a convenient model for the study of Clostridial Neurotoxins (CNT), most notably known as Tetanus and Botulinum neurotoxins, as they abundantly express both CNT receptors and intraneuronal substrates, i.e., Soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor activating protein receptors (SNARE proteins). Here, we describe a protocol for obtaining a highly pure ... [摘要]  来自产后啮齿动物的小脑颗粒神经元(CGN)已被广泛用作研究神经元发育,生理学和病理学的模型。 CGN体外培养维持成熟小脑颗粒细胞在体内显示的相同特征,包括发育致密的神经炎网络,神经元活动,神经递质释放和神经元的表达 蛋白质标记。 此外,CGN代表了梭菌神经毒素(CNT)研究的便利模型,最着名的是破伤风和肉毒杆菌神经毒素,因为它们大量表达CNT受体和神经元内基质, ie ,可溶性N-乙基马来酰亚胺 - 敏感因子激活蛋白受体(SNARE蛋白)。 在这里,我们描述了从出生后大鼠/小鼠获得高纯度CGN培养物的方案和用CNT中毒的简便方法。 我们还说明了评估CNT活性及其抑制的方便方法。

【背景】梭菌神经毒素(CNT)的大家族由破伤风神经毒素(TeNT)和肉毒杆菌神经毒素(BoNT)的多种变体形成,它们分别是破伤风和肉毒中毒的神经麻痹毒素(Schiavo et al。,2000; Johnson和Montecucco,2008; Rossetto et al。,2014)。 TeNT,七种BoNT血清型(BoNT / A至/ G)及其许多亚型是金属蛋白酶,通过切割SNARE蛋白(可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子激活蛋白受体),三种必需蛋白质来阻断神经递质的释放而引起神经麻痹。控制突触小泡与突触前质膜的融合(Rossetto et al。,2014; ...

In vitro Osteoclastogenesis Assays Using Primary Mouse Bone Marrow Cells
Author:
Date:
2018-06-05
[Abstract]  Osteoclasts are a group of bone-absorbing cells to degenerate bone matrix and play pivotal roles in bone growth and homeostasis. The unbalanced induction of osteoclast differentiation (osteoclastogenesis) in pathological conditions, such as osteoporosis, arthritis and skeleton metastasis of cancer, causes great pain, bone fracture, hypercalcemia or even death to patients. In vitro osteoclastogenesis analysis is useful to better understand osteoclast formation in physiological and pathological conditions. Here we summarized an easy-to-follow osteoclastogenesis protocol, which is suitable to evaluate the effect of different factors (cytokines, small molecular chemicals and conditioned medium from cell culture) on osteoclast differentiation using primary murine bone marrow cells. [摘要]  破骨细胞是一组骨吸收细胞,用于退化骨基质并在骨生长和体内平衡中发挥关键作用。 在诸如骨质疏松症,关节炎和癌症骨骼转移等病理状态下破骨细胞分化(破骨细胞生成)的不平衡诱导会导致严重疼痛,骨折,高钙血症或甚至导致患者死亡。 体外破骨细胞生成分析对于更好地理解生理和病理条件下的破骨细胞形成是有用的。 在这里,我们总结了一种易于遵循的破骨细胞生成方案,其适用于评估不同因素(细胞因子,小分子化学物质和来自细胞培养物的条件培养基)对使用原代鼠骨髓细胞的破骨细胞分化的影响。

【背景】骨骼在生命周期内通过连续且良好控制的吸光度和骨量形成来维持。在骨腔中,这两种活性中的每一种都是通过特定的细胞类型进行的:骨形成性成骨细胞和骨降解性破骨细胞。成骨细胞和破骨细胞分别来自骨驻留间充质细胞和造血谱系祖细胞。造血系统骨髓祖细胞分化为成熟破骨细胞主要受核因子-κB配体受体激活因子(RANKL,由TNFSF11编码)和巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF,由< )来自成骨细胞及其祖细胞(suda et al。 ,1999)。与其他细胞不同,破骨细胞通过融合一定数量的祖细胞而分化(boyle等人,2003)。因此,成熟破骨细胞的关键组织学特征是它们的多个核。成熟后,破骨细胞能够通过产生酸化的微环境来溶解主要由磷酸钙组成的骨质以及蛋白酶以降解细胞外基质(boyle等人,2003),从而能够骨吸收。溶解的骨基质释放成骨细胞使用的隔离生长因子以扩大其人群(kassem和bianco,2015)。成骨细胞和破骨细胞之间的这种相互作用确保了协调的骨形成和 - 退化活性,其在包括骨质疏松症,关节炎和癌症骨转移的过多疾病中失调(rodan和martin,2000; raisz,2005; gupta和massague ,2006)。根据之前的文献(lu等人,2009; wang等人,2014; zhuang等人,2017),在此我们描述使用原代鼠骨髓细胞进行体外破骨细胞发生试验的逐步方案,其允许研究广泛范围的因子/条件(例如细胞因子和条件培养基)对破骨细胞的影响分化。 )来自成骨细胞及其祖细胞(suda="" et="" al。="" ,1999)。与其他细胞不同,破骨细胞通过融合一定数量的祖细胞而分化(boyle等人,2003)。因此,成熟破骨细胞的关键组织学特征是它们的多个核。成熟后,破骨细胞能够通过产生酸化的微环境来溶解主要由磷酸钙组成的骨质以及蛋白酶以降解细胞外基质(boyle等人,2003),从而能够骨吸收。溶解的骨基质释放成骨细胞使用的隔离生长因子以扩大其人群(kassem和bianco,2015)。成骨细胞和破骨细胞之间的这种相互作用确保了协调的骨形成和="" -="" 退化活性,其在包括骨质疏松症,关节炎和癌症骨转移的过多疾病中失调(rodan和martin,2000;="" raisz,2005;="" gupta和massague="" ,2006)。根据之前的文献(lu等人,2009;="" wang等人,2014;=""> ...

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