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Costar® Multiple Well Cell Culture Plates

Costar ® 12孔透明多孔板

Company: Corning
Catalog#: 3513
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Company-protocol()
Other protocol()

Enhancement of Mucus Production in Eukaryotic Cells and Quantification of Adherent Mucus by ELISA
Author:
Date:
2018-06-20
[Abstract]  The mucosal surfaces of the gastrointestinal, respiratory, reproductive, and urinary tracts, and the surface of the eye harbor a resident microflora that lives in symbiosis with their host and forms a complex ecosystem. The protection of the vulnerable epithelium is primarily achieved by mucins that form a gel-like structure adherent to the apical cell surface. This mucus layer constitutes a physical and chemical barrier between the microbial flora and the underlying epithelium. Mucus is critical to the maintenance of a homeostatic relationship between the microbiota and its host. Subtle deviations from this dynamic interaction may result in major implications for health. The protocol in this article describes the procedures to grow low mucus-producing HT29 and high mucus-producing ... [摘要]  胃肠道,呼吸道,生殖道和泌尿道的粘膜表面以及眼睛表面都有一个居住的微生物群落,它们与宿主共生并形成一个复杂的生态系统。脆弱的上皮细胞的保护主要通过形成附着于顶端细胞表面的凝胶样结构的粘蛋白实现。该粘液层构成了微生物菌群和下层上皮之间的物理和化学屏障。粘液对维持微生物群与宿主之间的稳态关系至关重要。与这种动态互动的细微差异可能会对健康产生重大影响。本文中的方案描述了生长低粘液产生HT29和高粘液产生HT29-MTX-E12细胞的程序,维持细胞并通过ELISA将其用于粘液定量。此外,还介绍了如何评估分泌黏液的数量。该系统可用于研究粘液对抗细菌毒素的保护作用,例如测试不同培养条件对粘液产生的影响或分析分子通过粘液层的扩散。由于本方案中使用的ELISA可用于不同的物种和粘液蛋白,因此也可以使用其他细胞类型。

【背景】身体与外部环境的界面由粘膜表面形成。这些粘膜上皮组织可以在例如胃肠道,呼吸道,生殖道和尿道以及眼睛表面发现。由于它们暴露于外部环境中,许多微生物会聚集在这些组织中。因此,这些上皮细胞已经进化出多种防御机制来回应其易受微生物攻击的影响。许多防御性化合物被分泌到粘膜液中,包括粘蛋白,抗体,防御素,protegrin,聚集蛋白,cathelicidins,溶菌酶,组蛋白和一氧化氮(Kagnoff和Eckmann,1997,Lu等人,2002 ...

Generation of Luciferase-expressing Tumor Cell Lines
Author:
Date:
2018-04-20
[Abstract]  Murine tumor models have been critical to advances in our knowledge of tumor physiology and for the development of effective tumor therapies. Essential to these studies is the ability to both track tumor development and quantify tumor burden in vivo. For this purpose, the introduction of genes that confer tumors with bioluminescent properties has been a critical advance for oncologic studies in rodents. Methods of introducing bioluminescent genes, such as firefly luciferase, by viral transduction has allowed for the production of tumor cell lines that can be followed in vivo longitudinally over long periods of time. Here we describe methods for the production of stable luciferase expressing tumor cell lines by lentiviral transduction. [摘要]  鼠肿瘤模型对于我们对肿瘤生理学知识和有效肿瘤治疗方法发展的进展至关重要。 这些研究的关键是能够跟踪肿瘤发展并量化体内肿瘤负荷。 为此,引入赋予肿瘤生物发光特性的基因已经成为啮齿动物肿瘤研究的重要进展。 通过病毒转导引入生物发光基因(例如萤火虫萤光素酶)的方法已经允许产生可以在体内纵向长时间地进行的肿瘤细胞系。 在这里我们描述了通过慢病毒转导产生稳定表达荧光素酶的肿瘤细胞系的方法。

【背景】体内跟踪细胞最重要的是能够通过微创方法从外部检测它们。使用来自萤火虫的荧光素酶(Photinus pyralis )的酶促生物发光是用于体内基于图像的细胞追踪的广泛使用的方法。生物发光已被用于各种体内应用,包括报告基因表达的无创成像(Herschman,2004),研究昼夜节律(Southern and Millar,2005),成像脑卒中(Vandeputte

萤火虫荧光素酶氧化物萤光素在分子氧,镁和三磷酸腺苷存在下在560nm产生黄绿色光(Wilson和Hastings,1998; ...

Quantification of Plant Cell Death by Electrolyte Leakage Assay
Author:
Date:
2018-03-05
[Abstract]  We describe a protocol to measure the electrolyte leakage from plant tissues, resulting from loss of cell membrane integrity, which is a common definition of cell death. This simple protocol is designed to measure the electrolyte leakage from a tissue sample over a time course, so that the extent of cell death in the tissue can be monitored dynamically. In addition, it is easy to handle many tissue samples in parallel, which allows a high level of biological replication. Although the protocol is exemplified by cell death in Arabidopsis in response to pathogen challenge, it is easily applicable to other types of plant cell death. [摘要]  我们描述了测量植物组织中电解质渗漏的方案,其由细胞膜完整性的丧失导致,这是细胞死亡的常见定义。 这个简单的方案设计用于测量组织样本在一段时间内的电解质泄漏,从而可以动态监测组织中细胞死亡的程度。 另外,平行处理许多组织样品很容易,这允许高水平的生物复制。 尽管该方案以响应病原体攻击的拟南芥中的细胞死亡为例,但它很容易应用于其他类型的植物细胞死亡。

【背景】当细胞死亡并丧失细胞膜的完整性时,电解质如K +离子就会从细胞中渗出。因此,我们可以使用组织中泄漏的电解质的量作为组织中细胞死亡程度的代表。量化从组织泄漏的电解质的简单方法是测量含有将死细胞的组织的水的电解电导率的增加。这种电解质渗漏测定法已经应用于植物组织,以评估响应于生物和非生物胁迫而死亡的细胞的相对数量,所述细胞例如病原体攻击,昆虫食草,伤口,UV辐射,氧化应激,盐度,干旱,寒冷和热压力(Demidchik et al。,2014)。

最初的方法被设计成测量含有植物组织的水浴溶液在煮沸之前和之后的电导率,其中煮沸后的电导率被用于使组织尺寸差异标准化(Whitlow等人,1992年)。在这里我们描述了一个程序,通过在多个时间点测量叶片浮在12孔板上的水的电解电导率来动态监测叶盘中的电解质渗漏。可以合理地假设来自相同大小的组织样品的电解质的总量,例如从类似发育阶段的叶子冲出的相同面积的圆盘是相当的,并且没有必要测量电解质电导率之后煮沸组织。我们用细菌病原体,即丁香假单胞菌 ...

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