| Rearing of Culex spp. and Aedes spp. Mosquitoes
|
|
Author:
Date:
2017-09-05
[Abstract] Mosquito-transmitted pathogens cause major public health problems and contribute substantially to the global burden of disease. Aedes mosquitoes transmit dengue, Zika, yellow fever, and Chikungunya viruses; Culex mosquitoes transmit West Nile, Japanese encephalitis, and Saint Louis encephalitis viruses, among others. Experiments utilizing laboratory-reared colonized mosquitoes can address many issues such as vector biology, vector competence, vector-pathogen interaction, and vector control. The establishment of healthy and standardized mosquito colonies requires generation and implementation of protocols, attention to detail, and an understanding of the factors that affect mosquito fitness, such as temperature and humidity, nutrient quality and availability, population ...
[摘要] 蚊子传播的病原体引起重大的公共卫生问题，并对全球疾病负担作出重大贡献。 蚊子蚊子传播登革热，紫草，黄热病和基孔肯雅病毒; 库蚊的蚊子传播西尼罗河，日本脑炎和圣路易脑炎病毒等。 利用实验室饲养的殖民蚊子的实验可以解决许多问题，如载体生物学，载体能力，载体 - 病原体相互作用和载体控制。 建立健康规范的蚊子殖民地需要制定和实施议定书，注重细节，了解影响蚊子健康的因素，如温湿度，营养素质量和可获得性，人口密度，供血和交配行为， 和产蛋要求。 在这里，我们提出了Culex spp饲养的标准协议。 和伊蚊属 蚊子和养殖蚊子殖民地。
【背景】蚊子经历了四个生命阶段的完全变态：鸡蛋，幼虫，蛹和成年人。不成熟的阶段总是水生的。在实验室中成功维护蚊子取决于为每个发育阶段提供最佳条件。这些要求将随物种而变化，事实上，许多蚊子物种，如Cx。在实验室没有成功地殖民。殖民地维护是一个劳动密集型的过程，需要时间和注意处理和记录保存的细节。当标准协议成功时，保持蚊子的适应性，并且它们对可重复实验的适用性是最佳的。该协议是为淡水库莱克种和殖民养殖的白纹伊蚊种群而定殖和维护的。它已经成功应用于Cx。皮肤科，Cx，quinquifasciatus，Cx。 t alis埃及伊蚊白纹伊蚊triseriatus和Ae。日本等。
由于蚊子传播的大多数疾病是BSL-2和BSL-3生物制剂，因此这些载体的实验研究需要基于既定的指导方针进行遏制（Benedict ...
|
|
|
| Stereotaxic Surgery for Suprachiasmatic Nucleus Lesions in Mice
|
|
Author:
Date:
2017-06-20
[Abstract] Site-specific lesions are invaluable methods for investigating the function of brain regions within the central nervous system and can be used to study neural mechanisms of behaviors. Precise stereotaxic surgery is required to lesion small regions of the brain such as the suprachiasmatic nucleus (SCN), which harbors the master circadian clock. In this protocol, we describe stereotaxic surgery optimized for bilateral lesion of the mouse SCN by loading electric current. Success of the SCN lesion is verified histologically and behaviorally by monitoring arrhythmic locomotor activity. The SCN-lesioned mouse allows for the evaluation of behavioral, biochemical, and physiological consequences of ablation of the master circadian clock.
[摘要] 位点特异性病变是调查中枢神经系统中脑区功能的有价值的方法，可用于研究神经行为机制。 需要精确的立体定位手术来对大脑的小区域进行损伤，例如含有主昼夜节律钟的视交叉上核（SCN）。 在本协议中，我们介绍了通过加载电流优化小鼠SCN双侧病变的立体定位手术。 通过监测心律失常运动活动，组织学和行为学验证了SCN病变的成功。 SCN损伤的小鼠允许评估主昼夜节律钟的消融的行为，生化和生理后果。
【背景】视交叉上核（SCN）是哺乳动物脑下丘脑内的一个小区域。它位于视交叉的两侧，包含约20,000个神经元。 SCN被称为主昼夜节律振荡器（时钟）的位置，并且与亮 - 暗循环同步所需。 SCN的消融是评估主昼夜节律钟的生理影响的有用策略。
与通过病毒注射或SCN特异性启动子的基因修饰相比，SCN的电解损伤具有能够快速和局部消除主昼夜节律钟的优点。通过Nissl染色手术后可以通过电脉冲定位病变，手术后一天可以开始监测活动节律。此外，通过施用化学物质的病变通常导致非特异性损伤，因此其不像电脉冲的损伤那样精确，特别是对于诸如SCN的小靶标。因此，该协议提供了一个有用的策略来评估主昼夜节律钟的效果（输出）。
|
|
|
| Haustorium Induction Assay of the Parasitic Plant Phtheirospermum japonicum
|
|
Author:
Date:
2017-05-05
[Abstract] Phtheirospermum japonicum is a facultative root parasitic plant in the Orobanchaceae family used as a model parasitic plant. Facultative root parasites form an invasive organ called haustorium on the lateral parts of their roots. To functionally characterize parasitic abilities, quantification of haustorium numbers is required. However, this task is quite laborious and time consuming. Here we describe an efficient protocol to induce haustorium in vitro by haustorium-inducing chemicals and host root exudate treatments in P. japonicum.
[摘要] Phtheirospermum japonicum 是用作模型寄生植物的Orobanchaceae科的兼性根寄生植物。兼性根寄生虫在其根部的侧面部分形成称为吸管的侵入性器官。为了在功能上表征寄生能力，需要量化痰液数量。然而，这项任务是非常费力和耗时的。在这里，我们描述了一种有效的方案，通过引诱化学药物和宿主根系渗出物处理在体外诱导体外释放。血吸虫。
背景 寄生植物已经演变成从其他植物获得营养。一些寄生植物通过感染商业作物对农业造成重大损害（Spallek等人，2013）。有义务的寄生植物需要宿主完成其生命周期，而兼性寄生植物可以在没有宿主作为自养生物体的情况下存活，但如果宿主植物在附近则通过感染转移到异养（Westwood等人，2010）。所有寄生植物的共同特征是称为ium a的专门器官，其通过建立血管桥连接寄生虫与宿主（Saucet和Shirasu，2016; ...
|
|
|