| Optimize Highly Efficient Genetic Transformation Method of Spring Wheat (Triticum aestivum L.) Cultivars Using Mature Embryo
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Author:
Date:
2020-11-20
[Abstract] Genetic engineering is a powerful tool to develop desired traits in crop plants to make the crops suitable for future demand and changing environments. For the genetic engineering of wheat cultivars, the development of efficient transformation and regeneration systems has always been a primary requirement. Immature embryos have been used as explants for callus generation and genetic transformation of wheat cultivars, but the availability of healthy immature embryos as an explant throughout the year is difficult. In contrast, mature embryos are relatively easy to use throughout the year. The following protocol describes the genetic transformation of wheat cultivars using a mature embryo as explants by the Agrobacterium-mediated transformation method.
[摘要] [摘要]基因工程是开发农作物所需性状，使农作物适合未来需求和环境变化的有力工具。对于小麦品种的基因工程，开发高效的转化和再生系统一直是首要要求。未成熟的胚已被用作小麦品种的愈伤组织生成和遗传转化的外植体，但是全年都很难获得健康的未成熟胚作为外植体。相反，成熟的胚胎一年四季都相对容易使用。以下方案描述了使用小麦品种的遗传转化一个成熟胚由外植体的土壤杆菌介导的转化方法。
[背景]遗传转化是通过基因工程在小麦分子遗传学和改善使用的最重要的技术。微粒轰击和农杆菌介导的转化是小麦中遗传转化最广泛使用的两种方法（Vasil等，1992 ；Ding等，2009 ...
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| Quantification of Bacteria Residing in Caenorhabditis elegans Intestine
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Author:
Date:
2020-05-05
[Abstract] Quantification of intestinal colonization by pathogenic or commensal bacteria constitute a critical part of the analysis to understand host-microbe interactions during different time points of their interplay. Here we detail a method to isolate non-pathogenic and pathogenic bacteria from C. elegans intestines, and classify gut phenotypes induced by bacterial pathogens using fluorescently-tagged bacteria. Furthermore, these methods can be used to isolate and identify new culturable bacterial species from natural microbiomes of wild nematodes.
[摘要] [ 摘要] 量化中肠道定植通过致病或者共生细菌构成一个关键部分中的分析要了解主机微生物相互作用在不同的时间点中他们的相互作用。在这里我们详细介绍一个方法要隔离非致病性和致病性细菌从C. 线虫 肠，而且分类肠表型诱导由细菌病原体使用荧光标记的细菌。此外，这些方法可以被用于为了隔离和识别新的可培养的细菌种类从天然微生物组中野生线虫。
[ 背景] 在该野生，线虫是否暴露为一宽品种中细菌和真菌群落（Frezal 而菲利克斯，2015年）。在实验室条件下，该线虫C. 线虫已被历史维护在一个单一食物源（布伦纳，1974年）。^ h H但是，该蠕虫被冲击下随着各种致病菌和一个增加数中的非- 病原细菌中多样化的营养质量（Garsin 的Et 铝，。2003 ; Gracida 而Eckmann，2013 ; 德克森的Et 铝，。2016 ; 麦克尼尔的Et 铝。，2013 ; 谭的Et 铝，1999年）。C. 线虫胚胎能要提取从妊娠雌雄同体通过使用次氯酸钠处理。这个过程省去细菌允许的新世代要被暴露游记要一个微生物吨。他的优势提供了一个独特的框架为了研究宿主与微生物相互作用。遗传易处理中的线虫和细菌允许为了研究真核生物（Garsin 的Et 铝，2003）和原核（加拉格尔和Manoil，2001）基因功能在不同的时间点在这个动态 相互作用。
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| Manganese Superoxide Dismutase Activity Assay in the Yeast Saccharomyces cerevisiae
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Author:
Date:
2020-03-05
[Abstract] Superoxide dismutases (SODs) act as a primary defence against reactive oxygen species (ROS) by converting superoxide anion radicals (O2-) into molecular oxygen (O2) and hydrogen peroxide (H2O2). Members of this enzyme family include CuZnSODs, MnSODs, FeSODs, and NiSODs, depending on the nature of the cofactor that is required for proper activity. Most eukaryotes, including yeast, possess CuZnSOD and MnSOD. This protocol aims at assessing the activity of the yeast Saccharomyces cerevisiae MnSOD Sod2p from cellular extracts using nitroblue tetrazolium staining. This method can be used to estimate the cellular bioavailability of Mn2+ as well as to evaluate the redox state of the cell.
[摘要] [摘要 ] 超氧化物歧化酶（SOD能）充当主防御针对反应性氧物质（ROS）通过转换的超氧阴离子自由基（O 2 - ）为分子氧（O 2 ）和过氧化氢（H 2 ? 2 ）。这种酶的家庭成员包括CuZnSODs ，MnSODs ，FeSODs 和NiSODs ，这取决于是需要适当的活动辅助因子的性质。大多数真核生物，包括酵母，都具有CuZnSOD 和MnSOD 。该协议旨在评估酵母的活性 使用硝基蓝四唑染色法从细胞提取物中提取酿酒酵母MnSOD Sod2p 。该方法可用于估计Mn 2+ 的细胞生物利用度以及评估细胞的氧化还原状态。
[背景 ] 的SODs被定义为减少正常有氧代谢为氧气和过氧化氢期间形成的氧的有害自由基含金属的抗氧化剂酶。：这些酶是基于需要作为辅因子进行适当的酶活性的金属分类CuZnSODs ，MnSODs ，FeSODs ，和NiSODs 。在酿酒酵母中，有两个S OD ：CuZn-Sod1p和Mn-Sod2p（Abreu和Cabelli ...
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