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Sodium chloride

氯化钠

Company: Sigma-Aldrich
Catalog#: S9888
Bio-protocol()
Company-protocol()
Other protocol()

Total RNA Extraction from Dinoflagellate Symbiodinium Cells
Author:
Date:
2018-06-05
[Abstract]  Dinoflagellates are unicellular algae that can have photosynthetic or nonphotosynthetic lifestyles. Dinoflagellates in the genus Symbiodinium can enter endosymbiotic associations with corals, providing the metabolic basis for the highly productive and biologically diverse coral-reef ecosystems (Hoegh-Guldberg, 1999), as well as with other cnidarians, including sea anemones and jellyfish, and non-cnidarian hosts (Trench, 1993; Lobban et al., 2002; Mordret et al., 2016).

Here, I describe a protocol for isolating total RNA from Symbiodinium cells.
[摘要]  鞭毛藻是单细胞藻类,可以有光合或非光合生活方式。 Symbiodinium属中的甲藻类可以与珊瑚进入内共生关系,为高生产力和生物多样性珊瑚礁生态系统提供代谢基础(Hoegh-Guldberg,1999),以及其他的cnidarians,包括 海葵和海蜇,以及非刺猬寄主(Trench,1993; Lobban等人,2002; Mordret等人,2016)。

在这里,我描述了从Symbiodinium细胞中分离总RNA的方案。

Dual-sided Voltage-sensitive Dye Imaging of Leech Ganglia
Author:
Date:
2018-03-05
[Abstract]  In this protocol, we introduce an effective method for voltage-sensitive dye (VSD) loading and imaging of leech ganglia as used in Tomina and Wagenaar (2017). Dissection and dye loading procedures are the most critical steps toward successful whole-ganglion VSD imaging. The former entails the removal of the sheath that covers neurons in the segmental ganglion of the leech, which is required for successful dye loading. The latter entails gently flowing a new generation VSD, VF2.1(OMe).H, onto both sides of the ganglion simultaneously using a pair of peristaltic pumps. We expect the described techniques to translate broadly to wide-field VSD imaging in other thin and relatively transparent nervous systems. [摘要]  在这个协议中,我们介绍了一种有效的方法,用于Tomina和Wagenaar(2017)中使用的电压敏感染料(VSD)加载和水蛭神经节成像。 解剖和染料加载程序是成功完成全神经节VSD成像的关键步骤。 前者需要去除覆盖水蛭节段神经节神经元的鞘,这是成功染料加载所需的。 后者需要使用一对蠕动泵同时轻柔地将新一代VSD VF2.1(OMe).H流入神经节的两侧。 我们期望所描述的技术广泛地转化为其他薄且相对透明的神经系统中的宽视场VSD成像。

【背景】双面显微镜是一种宽视野荧光成像系统,由一对精确对准的显微镜组成,用于观察来自对面的神经元制剂并且一次显示不同的焦平面(Tomina and Wagenaar,2017)。通过将该光学系统与新一代电压敏感染料(VSD),VoltageFluor(Miller等人,2012; Woodford等人,2015),荧光可以同时从不同深度的神经元捕获编码具有高保真度膜电压的信号。我们将这种泛神经元记录系统应用于药用水蛭的神经系统,我们利用电生理学方法诱发虚构行为并定量控制可识别神经元的膜电位(Tomina and ...

Transient Gene Expression for the Characteristic Signal Sequences and the Estimation of the Localization of Target Protein in Plant Cell
Author:
Date:
2018-02-20
[Abstract]  We have proposed and tested a method for characterization of the signal sequences and determinations of target protein localization in a plant cell. This method, called the AgI-PrI, implies extraction of protoplasts from plant tissues after agroinfiltration. The suggested approach combines the advantages of two widely used methods for transient gene expression in plants–agroinfiltration and transfection of isolated protoplasts. The AgI-PrI technic can be applied to other plant species. [摘要]  我们已经提出并测试了用于表征信号序列和确定植物细胞中目标蛋白质定位的方法。 这种称为AgI-PrI的方法意味着在农杆菌浸润后从植物组织中提取原生质体。 所提出的方法结合了两种广泛使用的用于植物中瞬时基因表达的方法的优点 - 农杆菌浸润和转分离的原生质体。 AgI-PrI技术可应用于其他植物物种。

【背景】迄今为止,已经开发并广泛使用以下用于植物中基因瞬时表达的技术:农杆菌渗入,植物外植体的生物射弹和使用聚乙二醇或电穿孔转染原生质体。这些方法的有效性已被清楚地证明。植物中瞬时表达基因的每种策略以及其益处具有其局限性和缺点,例如由于植物表皮细胞的复杂形状(农杆菌浸润)导致的重组报道蛋白在植物细胞区室中的良好成像困难,低转化效率以及专用设备和辅助材料(用于生物弹)的必要性,以及高活性原生质体产量和有效转染所需的复杂准备程序。这是开发和测试用于在植物细胞中瞬时表达基因的新方法的原因,优选通过改进实验方案并保留研究结果的生理意义。由于蛋白质在包括植物在内的活生物体中的细胞定位与它们的功能密切相关,活细胞中蛋白质的良好可视化成为评估蛋白质功能的重要工具。

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