| Assays for Oxidative Responses of Fusarium graminearum Strains to Superoxide Radicals
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Author:
Date:
2018-09-05
[Abstract] The ascomycete fungus Fusarium graminearum is a major causal agent of Fusarium head blight (FHB), a devastating disease affecting small grains cereals worldwide. To better understand the pathogenesis of this fungus, we provide here an easy-to-use protocol to examine the sensitivity of the wild-type and mutant strains of F. graminearum to oxidative stress from superoxide anions (O2•-) generated by menadione. Similarly, this assay can also be used to detect other stress responses of different fungal strains to various stress agents. The change in stress response of a mutant can offer a clue for the biological function of mutated genes.
[摘要] 子囊菌真菌 Fusarium graminearum 是 Fusarium 头枯病（FHB）的主要致病因子，FHB是一种影响全世界小粒谷物的破坏性疾病。 为了更好地了解这种真菌的发病机理，我们在此提供了一种易于使用的方案来检测 F的野生型和突变株的敏感性。 禾谷镰刀菌对由甲萘醌产生的超氧阴离子（O2 • - ）的氧化应激。 类似地，该测定也可用于检测不同真菌菌株对各种应激物的其他应激反应。 突变体的应激反应的变化可以为突变基因的生物学功能提供线索。
【背景】子囊菌真菌 Fusarium graminearum （以前也被称为 Gibberella zeae 的性状）不仅是 Fusarium 头枯病和幼苗的主要致病因子小麦和大麦枯萎病，也是玉米赤霉病茎腐病的重要致病因子之一（Dal Bello et al。，2002; Bai and Shaner，2004; Kazan et al。，2012）。除了导致谷物大量减产外，这种真菌还会产生影响人类和动物健康的真菌毒素。因此，这种真菌受到广泛关注，在所有研究的植物病原真菌中排名第四（Dean et al。，2012）。
F。禾本科植物对死有机物进行过冬，特别是对受感染的小粒和玉米作物残留物进行过度研究。为了在如此广泛的环境中生存， F. graminearum ...
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| Generation of Fusarium graminearum Knockout Mutants by the Split-marker Recombination Approach
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Author:
Date:
2018-08-20
[Abstract] Fusarium graminearum is a destructive phytopathogen and shows an impressive metabolic diversity. Gene deletion is an important and useful approach for gene function study. Here we present a protocol for generating gene deletion mutant by applying “split-marker” deletion strategy (Catlett et al., 2003) with PEG-mediated protoplast transformation (Yuan et al., 2008; Martín, 2015).
[摘要] 禾谷镰刀菌是一种破坏性的植物病原体，具有令人印象深刻的代谢多样性。 基因缺失是基因功能研究的重要且有用的方法。 在这里，我们提出了一个协议，通过应用“分裂标记”删除策略（Catlett et al。，2003）与PEG介导的原生质体转化（Yuan 等。，2008;Martín，2015）。
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| Wheat Coleoptile Inoculation by Fusarium graminearum for Large-scale Phenotypic Analysis
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Author:
Date:
2017-08-05
[Abstract] The ascomycete fungus Fusarium graminearum is a destructive fungal pathogen of wheat, barley and maize. Although reverse genetics and homologous recombination gene deletion methods have generated thousands of gene deletion mutants of F. graminearum, evaluating virulence of these fungal mutants is still a rate-limiting step. Here we present a protocol for inoculation of wheat coleoptiles with conidial suspensions for large-scale phenotypic analysis, and describe how it can also be used to assess fungal infectious growth and symptom developmentat a cellular scale. The inoculation method described in this protocol provides highly reproducible results in wheat coleoptile infection by F. graminearum.
[摘要] 子囊菌真菌禾谷镰刀菌是小麦，大麦和玉米的破坏性真菌病原体。 尽管反向遗传学和同源重组基因缺失方法已经产生了成千上万的F基因缺失突变体。 评估这些真菌突变体的毒力仍然是一个速率限制的步骤。 在这里，我们提出了用于大规模表型分析用分生孢子悬浮液接种小麦胚芽鞘的方案，并且描述了如何也可以用它来评估细菌感染生长和症状发展。 本方案中描述的接种方法通过F提供了小麦胚芽鞘感染的高度可重复的结果。菌。
【背景】镰刀菌镰刀霉（以前也称为赤霉菌）是一种破坏性病原体，在感染后，导致镰孢霉病（FHB）和幼苗枯萎病（Dal Bello等人，2002; Bai和Shaner，2004; Kazan等人，2012年），谷物作物以及玉米的茎和耳腐。已经进行了广泛的分子和遗传学研究，以研究。F之间的相互作用。禾谷镰刀和小麦。鉴于有效的遗传转化系统和井注释基因组的可用性，数百种。已经研究了禾谷镰刀菌基因在营养生长，性发育，次生代谢，应激反应以及宿主中的毒力方面的作用（Jia and Tang，2015）。然而，已经鉴定了仅几种真菌效应物（例如，FGL1和脱氧雪腐镰刀菌烯醇）和宿主抗性基因（例如，小麦Fhb1 ）（Proctor ，1995;Blümke等人，2014; Rawat等人，2016）。
F。据报道，禾谷镰刀菌缺乏通常在宿主中诱导基因为基因介导的抗性的病原体特异性模式（van ...
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