| Qualitative in vivo Bioluminescence Imaging
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Author:
Date:
2018-09-20
[Abstract] Bioluminescence imaging (BLI) technology is an advanced method of carrying out molecular imaging on live laboratory animals in vivo. This powerful technique is widely-used in studying a variety of biological processes, and it has been an ideal tool in exploring tumor growth and metastatic spread in real-time. This technique ensures the optimal use of laboratory animal resources, particularly the ethical principle of reduction in animal use, given its non-invasive nature, ensuring that ongoing biological processes can be studied over time in the same animal, without the need to euthanize groups of mice at specific time points. In this protocol, the luciferase imaging technique was developed to study the effect of co-inoculating pericytes (contractile, αSMA+ mesenchymal ...
[摘要] 生物发光成像（BLI）技术是一种在体内实验室动物上进行分子成像的先进方法。 这种强大的技术广泛应用于研究各种生物过程，是实时探索肿瘤生长和转移扩散的理想工具。 该技术确保实验室动物资源的最佳利用，特别是减少动物使用的伦理原则，考虑到其非侵入性，确保可以在同一动物中随时间研究正在进行的生物过程，而无需安乐死 小鼠在特定的时间点。 在该方案中，开发了荧光素酶成像技术以研究共同接种周细胞（收缩性，αSMA + 间充质干细胞样细胞，位于微血管内的细胞）对生长和转移性扩散的影响。 卵巢癌使用侵袭性卵巢癌细胞系-OVCAR-5-作为例子。
【背景】生物发光成像（BLI）的原理是基于相对简单的生化过程的发光特性，即，荧光素酶介导的分子底物荧光素氧化产生光。在癌症研究中，BLI是一种流行的工具（Contag et ...
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| Measurement of Mesenchymal Stem Cells Attachment to Endothelial Cells
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Author:
Date:
2018-03-20
[Abstract] Mesenchymal stem cells (MSCs) have shown profound therapeutic potential in tissue repair and regeneration. However, recent studies indicate that MSCs are largely entrapped in lungs after intravenous delivery and die shortly. The underlying mechanisms have been poorly understood. We have provided evidence to show that excess expression and activation of integrins in culture-expanded MSCs is a critical cause of MSCs adhesion to endothelial cells of the lung microarteries resulting in the entrapment of the cells (Wang et al., 2015). Therefore, it may be meaningful to test the adhesive ability of MSCs to endothelial cells in vitro before intravenous administration to avoid their lung vascular obstructions. Here we report a simple method to measure MSCs attachment to ...
[摘要] 间充质干细胞（MSCs）在组织修复和再生中显示出深远的治疗潜力。 然而，最近的研究表明，MSCs在静脉内递送后很大程度上被截留在肺中并且很快死亡。 基本的机制一直不甚了解。 我们提供的证据表明培养扩增的MSCs中整联蛋白的过量表达和活化是MSCs与肺微动脉的内皮细胞粘附的关键原因，导致细胞的包埋（Wang等人 >，2015）。 因此，在静脉给药之前测试MSC对体外内皮细胞的粘附能力以避免它们的肺血管阻塞可能是有意义的。 在这里，我们报告了一种简单的方法来衡量MSC与内皮细胞的附着。
【背景】间充质干细胞（MSCs）正在成为一种极具潜力的治疗药物，许多临床试验正在进行中（Salem和Thiemermann，2010）。由于MSC的方便性和安全性，静脉输注MSCs已成为近期临床试验中MSCs治疗的流行途径（Wu and Zhao，2012）。然而，越来越多的证据表明，MSCs在血管内注射后引起相当大的血管阻塞。在静脉内输注时，超过80％的MSC被包埋在肺中，并且在急性缺血性心脏或脑中仅检测到少于1％的MSC（Lee等人，2009; Toma等人，等人，2009年）。
最近的研究表明，MSCs在静脉内给药后大部分停留在前毛细血管微血管中，并且其中大部分在短期内局部缺血死亡（Toma等人，2009）。因此，血管内给药的MSC的安全性和有效性已成为人们日益关注的问题。尚未完全了解MSCs血管阻塞的机制。 ...
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| Generation of Tumour-stroma Minispheroids for Drug Efficacy Testing
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Author:
Date:
2017-01-05
[Abstract] The three-dimensional organisation of cells in a tissue and their interaction with adjacent cells and extracellular matrix is a key determinant of cellular responses, including how tumour cells respond to stress conditions or therapeutic drugs (Elliott and Yuan, 2011). In vivo, tumour cells are embedded in a stroma formed primarily by fibroblasts that produce an extracellular matrix and enwoven with blood vessels. The 3D mixed cell type spheroid model described here incorporates these key features of the tissue microenvironment that in vivo tumours exist in; namely the three-dimensional organisation, the most abundant stromal cell types (fibroblasts and endothelial cells), and extracellular matrix. This method combined with confocal microscopy can be a powerful tool to ...
[摘要] 组织中细胞的三维组织及其与相邻细胞和细胞外基质的相互作用是细胞反应的关键决定因素，包括肿瘤细胞如何对应激条件或治疗药物的反应（Elliott和Yuan，2011）。在体内，肿瘤细胞被包埋在主要由成纤维细胞形成的基质中，所述成纤维细胞产生细胞外基质并用血管编织。这里描述的3D混合细胞类型球体模型包括了体内存在肿瘤的组织微环境的这些关键特征;即三维组织，最丰富的基质细胞类型（成纤维细胞和内皮细胞）和细胞外基质。该方法结合共聚焦显微镜可以成为不同肿瘤类型的药物敏感性，血管生成和细胞迁移/侵袭测定的有力工具。
背景 传统的单层细胞培养（二维）强化人造环境，其与体内存在的组织细胞大不相同。最重要的区别之一是在单层培养物中，细胞是极化的，即，面向培养物的细胞表面和暴露于培养基的上细胞表面完全不同，经常反对的信号（Fitzgerald等人，2015）。为了解决细胞极化的问题，肿瘤球状体培养越来越多地用于癌症研究。肿瘤球体可以通过减少其通常发生在单层培养物中的生长培养基的扩散和稀释，通过细胞因子和趋化因子复制存在于组织中的三维细胞 - 细胞相互作用和一定程度的旁分泌信号传导（Lawlor等，2002; ...
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