| Imaging the Pharynx to Measure the Uptake of Doxorubicin in Caenorhabditis elegans
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Author:
Date:
2017-05-20
[Abstract] Caenorhabditis elegans offers an array of advantages to investigate the roles of uptake transporters. Herein, an epifluorescent microscopy approach was developed to monitor the uptake of the autofluorescent anticancer drug, doxorubicin, into the pharynx of C. elegans by organic cation transporters.
[摘要] 秀丽隐杆线虫提供了一系列优势来调查摄取转运蛋白的作用。在这里，开发了荧光显微镜方法来监测自发荧光抗癌药物多柔比星进入C的咽部。有机阳离子转运蛋白。
背景 人类细胞具有超过450个溶质载体转运蛋白，其被认为有助于摄取几种离子，营养物质以及治疗和抗癌药物（Cesar-Razquin等人，2015）。然而，大量这些摄取转运蛋白的作用和底物是未知的。线虫是一种廉价的模型生物体，它比哺乳动物细胞提供了许多优点，可以快速研究许多高度保守的生物过程。在过去十年中，这种生物一直在几个药物发现计划中发挥作用，以鉴定新型小分子，例如，作为抗微生物剂和抑制氧化应激的小分子，尽管生物活性化合物的产量不太明显（Burns等人，2010; O'Reilly等人，，2014）。我们认为如果通过摄取转运蛋白进入动物细胞的分子更多和选择性地流入，则回收率可能更高。迄今为止，已经进行了三项研究以了解摄取转运蛋白在C中的作用。 elegans （Wu et al。，1999; Cheah等人，2013; Papaluca和Ramotar，2016）。因此，该生物体中摄取转运蛋白的功能和底物特异性的表征将有利于改进用于鉴定新生物活性分子的策略。在这里，我们概述了一种监测抗癌药物多柔比星摄入到C的咽中的方法。 elegans （Papaluca和Ramotar，2016）。多柔比星自发荧光可以通过几种广泛可用的检测系统如荧光显微镜来监测。我们注意到，从这种方法可以获得若干好处，包括通过竞争多柔比星摄取来寻找转运蛋白的新型治疗底物。 ...
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| Immunoprecipitation of Proteins in Caenorhabditis elegans
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Author:
Date:
2015-04-05
[Abstract] Immunoprecipitation (IP) is a biochemical technique to precipitate a protein out of solution using an antigen that can specifically bind to that protein. IP can be performed to isolate and concentrate one particular protein from a sample of thousands of different proteins. IP is also readily performed to pull down interacting proteins of complexes out of solution. This protocol outlines the methods used to IP proteins in whole worm lysates and their preparation for detection on Western blots using denaturing conditions.
[摘要] 免疫沉淀（IP）是使用可以特异性结合该蛋白质的抗原将蛋白质从溶液中沉淀出来的生物化学技术。 IP可以从数千种不同蛋白质的样品中分离和浓缩一种特定蛋白质。 IP也容易进行以从溶液中取出复合物的相互作用蛋白。 该协议概述了用于IP蛋白在整个蠕虫裂解物中的方法及其用于使用变性条件在蛋白质印迹上检测的方法。
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