| Flow Cytometric Analysis of HIV-1 Transcriptional Activity in Response to shRNA Knockdown in A2 and A72 J-Lat Cell Lines
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Author:
Date:
2017-06-05
[Abstract] The main obstacle to eradicating HIV-1 from patients is post-integration latency (Finzi et al., 1999). Antiretroviral treatments target only actively replicating virus, while latent infections that have low or no transcriptional activity remain untreated (Sedaghat et al., 2007). To eliminate viral reservoirs, one strategy focuses on reversing HIV-1 latency via ‘shock and kill’ (Deeks, 2012). The basis of this strategy is to overcome the molecular mechanisms of HIV-1 latency by therapeutically inducing viral gene and protein expression under antiretroviral therapy and to cause selective cell death via the lytic properties of the virus, or the immune system now recognizing the infected cells. Recently, a number of studies have described the therapeutic potential of ...
[摘要] 消除HIV-1患者的主要障碍是后整合延迟（Finzi等人，1999）。抗逆转录病毒治疗仅针对主动复制病毒，而具有低转录活性或无转录活性的潜伏感染仍未得到治疗（Sedaghat等人，2007）。为了消除病毒性水库，一项战略重点是通过“休克和杀死”来逆转HIV-1潜伏期（Deeks，2012）。该策略的基础是通过在抗逆转录病毒治疗下通过治疗性诱导病毒基因和蛋白质表达来克服HIV-1潜伏期的分子机制，并通过病毒的溶解性质或现在识别感染细胞的免疫系统引起选择性细胞死亡。最近，许多研究已经描述了药物抑制人类溴结构域蛋白质的溴结构域和末端（BET）家族的成员的治疗潜力（Filippakopoulos等人，2010; Dawson等人＆ / em>，2011; Delmore等人，2011），其包括BRD2，BRB3，BRD4和BRDT。小分子BET抑制剂，例如JQ1（Filippakopoulos et al。，2010; Delmore等人，2011），I-BET（Nicodeme等人＆lt; / ...
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| Flow Cytometric Analysis of Drug-induced HIV-1 Transcriptional Activity in A2 and A72 J-Lat Cell Lines
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Author:
Date:
2017-05-20
[Abstract] The main obstacle to eradicating HIV-1 from patients is post-integration latency (Finzi et al., 1999). Antiretroviral treatments target only actively replicating virus, while latent infections that have low or no transcriptional activity remain untreated (Sedaghat et al., 2007). A combination of antiretroviral treatments with latency-purging strategies may accelerate the depletion of latent reservoirs and lead to a cure (Geeraert et al., 2008). Current strategies to reactivate HIV-1 from latency include use of prostratin, a non-tumor-promoting phorbol ester (Williams et al., 2004), BET inhibitors (Filippakopoulos et al., 2010; Delmore et al., 2011), and histone deacetylase (HDAC) inhibitors, such as suberoylanilidehydroxamic acid (i.e. ...
[摘要] 消除HIV-1患者的主要障碍是后整合延迟（Finzi等，1999）。抗逆转录病毒治疗仅针对主动复制病毒，而具有低转录活性或无转录活性的潜伏性感染仍未得到治疗（Sedaghat et al。，2007）。抗逆转录病毒治疗与潜伏期清除策略的组合可以加速潜伏性储层的消耗并导致治愈（Geeraert等人，2008）。从潜伏期重新激活HIV-1的当前策略包括使用前列腺素，非促肿瘤佛波酯（Williams等人，2004），BET抑制剂（Filippakopoulos等人， （HDM）抑制剂，例如辛苯甲酰苯胺异羟肟酸（SAHA或Vorinostat））（Kelly ，2010; Delmore等人，2011）和组蛋白脱乙酰酶et al。，2003; Archin等人，2009; Contreras等人，2009; Edelstein等人。 ，2009）。由于HIV-1潜伏期的机制是多样的，有效的再激活可能需要组合策略（Quivy等人，2002）。以下方案描述了基于流式细胞仪的方法，用于量化药物治疗后HIV-1长末端重复（LTR）的转录激活。该协议被优化用于研究含有GFP盒的潜伏的HIV-1感染的Jurkat（J-Lat）细胞系。含有不同报道物的J-Lats，例如萤光素酶，可以用所述的药物进行治疗，但必须进行不同的分析。
背景 ...
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| Murine Leukemia Virus (MLV)-based Coronavirus Spike-pseudotyped Particle Production and Infection
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Author:
Date:
2016-12-05
[Abstract] Viral pseudotyped particles (pp) are enveloped virus particles, typically derived from retroviruses or rhabdoviruses, that harbor heterologous envelope glycoproteins on their surface and a genome lacking essential genes. These synthetic viral particles are safer surrogates of native viruses and acquire the tropism and host entry pathway characteristics governed by the heterologous envelope glycoprotein used. They have proven to be very useful tools used in research with many applications, such as enabling the study of entry pathways of enveloped viruses and to generate effective gene-delivery vectors. The basis for their generation lies in the capacity of some viruses, such as murine leukemia virus (MLV), to incorporate envelope glycoproteins of other viruses into a pseudotyped virus ...
[摘要] 病毒假型颗粒（pp）是包膜病毒颗粒，通常来自逆转录病毒或弹状病毒，在其表面上携带异源性包膜糖蛋白和缺乏必需基因的基因组。这些合成的病毒颗粒是天然病毒的更安全的替代品并且获得由所使用的异源性包膜糖蛋白控制的嗜性和宿主进入途径特征。它们已被证明是用于具有许多应用的研究中非常有用的工具，例如使得能够研究包膜病毒的进入途径并产生有效的基因递送载体。它们的产生的基础在于一些病毒如鼠白血病病毒（MLV）的能力，以将其他病毒的包膜糖蛋白掺入假型病毒颗粒中。这些可以被工程化以包含报道基因例如荧光素酶，使得能够在易感细胞的假型粒子感染时定量病毒进入事件。在这里，我们详细说明使用中东呼吸综合征冠状病毒（MERS-CoV）尖峰（S）作为待并入的异源包膜糖蛋白的实例，能够产生基于MLV的假型包装颗粒的方案。我们还描述了这些颗粒如何用于感染易感细胞并通过荧光素酶测定进行定量感染性读数。
关键词：假型颗粒，鼠白血病病毒，包膜糖蛋白，冠状病毒，
[背景] ...
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