| A Lentiviral Pseudotype ELLA for the Measurement of Antibodies Against Influenza Neuraminidase
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Author:
Date:
2018-07-20
[Abstract] This protocol describes the rapid and safe production of lentiviral pseudotypes characterized by a lentiviral core containing a reporter, in conjunction with avian influenza haemagglutinin (HA) and human neuraminidase (NA) glycoproteins on the surface. Production is optimized with Endofectin LentiTM transfection reagent in 6-well plate format. These pseudotyped viruses can be employed for serological assays of surface glycoproteins HA and NA. They can be efficiently used to perform the ELLA (Enzyme-linked lectin assay) to measure NA inhibiting antibodies in lieu of using reassortant virus or Triton X-100 inactivated wild-type virus as source of antigen, which may require higher biosafety levels.
[摘要] 该方案描述了慢病毒假型的快速和安全生产，其特征在于含有报道分子的慢病毒核心，以及表面上的禽流感血凝素（HA）和人神经氨酸酶（NA）糖蛋白。 使用6孔板形式的Endofectin Lenti TM 转染试剂优化生产。 这些假型病毒可用于表面糖蛋白HA和NA的血清学测定。 它们可以有效地用于进行ELLA（酶联凝集素测定）以测量NA抑制抗体，而不是使用重配病毒或Triton X-100灭活的野生型病毒作为抗原来源，这可能需要更高的生物安全水平。
【背景】流感病毒假型的产生先前已被广泛描述（Nefkens et al。，2007; Temperton et al。，2007; Carnell et al。，2015）。需要一种安全快速的系统来评估通过ELLA测定靶向NA的抗体，避免使用重配错配病毒或野生型病毒，这已经通过产生携带NA型流感假型来满足（Prevato et al。，2015）。最近的一项研究（Biuso et al。，2017）证实HA与NA的共表达改善了新形成的假型慢病毒的释放。在这里，我们报告了一种简单，广泛适用和优化的PV生产方案，使用6孔板格式的Endofectin Lenti TM ...
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| ELISA for Alpha-hemolysin (Hla) in Methicilin-resistant Staphylococcus aureus (MRSA)
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Author:
Date:
2014-05-05
[Abstract] Anti-virulence agents against MRSA inhibit the production of disease-causing virulence factors, such as alpha-hemolysin, but are neither bacteriostatic nor bactericidal. Here we discuss a rapid method to screen for MRSA anti-virulence agents by measuring alpha-hemolysin production through ELISA. This protocol can be used with other alpha-hemolysin producing bacteria or for other excreted toxins to which antibodies exist.
[摘要] 针对MRSA的抗毒剂抑制引起疾病的毒力因子如α-溶血素的产生，但既不是抑菌性的也不是杀细菌性的。 在这里我们讨论一种快速方法来筛选MRSA抗毒力试剂通过测量α-溶血素的生产通过ELISA。 该方案可以与其它产生α-溶血素的细菌或存在抗体的其它排泄毒素一起使用。
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