| Zebrafish Bacterial Infection Assay to Study Host-Pathogen Interactions
|
|
Author:
Date:
2020-03-05
[Abstract] The study of host-pathogen interactions has improved our understanding of both pathogenesis and the response of the host to infection, including both innate and adaptive responses. Neutrophils and macrophages represent the first line of innate host defense against any infection. The zebrafish is an ideal model to study the response of these cells to a variety of pathogens. Zebrafish possess both neutrophils and macrophages exhibiting similar defense mechanisms to their human counterparts. The transparency of zebrafish embryos greatly facilitates in vivo tracking of infection dynamics in a non-invasive manner at high-resolution using labelled pathogens, while immune cells can also be labelled transgenically to enable even more in-depth analysis. Here we describe a procedure for ...
[摘要]
[ 文摘动作 ] 宿主-病原体相互作用的研究已经提高了我们既发病机制和宿主对INFE响应的理解ction，包括先天性和适应性应答。中性粒细胞和巨噬细胞是抵抗任何感染的先天宿主防御的第一线。斑马鱼是研究这些细胞对多种病原体反应的理想模型。斑马鱼同时具有嗜中性粒细胞和巨噬细胞表现出荷兰国际集团类似的防御机制，它们人的相应。斑马鱼胚胎的透明性极大地促进了体内 使用标记的病原体以非侵入性的方式以高分辨率跟踪感染动态，同时还可以通过转基因方式标记免疫细胞，以进行更深入的分析。在这里，我们描述了一种方法，用于执行一个在斑马鱼中的细菌感染测定胚胎使用荧光标记的大肠杆菌细菌和演示感染动力学的监测和定量。值得注意的是，该程序有助于理解对驱动先天免疫应答至关重要的基因的功能作用。
[ 背景 ] 宿主-病原体相互作用的研究是重要的是了解疾病的发病机理，也为有效治疗药物的开发。需要确定宿主和病原体的多个方面，以确定宿主中的潜在危险因素和病原体中的关键毒力因素。先天性免疫是抵抗感染的第一道防线，它会引发一连串的反应，包括炎症，中和和适应性免疫系统各组分的募集（Akira et ...
|
|
|
| Drosophila Model of Leishmania amazonensis Infection
|
|
Author:
Date:
2017-12-05
[Abstract] This protocol describes how to generate and harvest antibody-free L. amazonensis amastigotes, and how to infect adult Drosophila melanogaster with these parasites. This model recapitulates key aspects of the interactions between Leishmania amastigotes and animal phagocytes.
[摘要] 该协议描述了如何产生和收获无抗体的L型。 amazonensis amastigotes，以及如何用这些寄生虫感染成年果蝇（Drosophila melanogaster）。 这个模型概括了利什曼原虫和动物吞噬细胞之间相互作用的关键方面。
【背景】由利什曼原虫引起的利什曼病，根据宿主的寄生虫种类和免疫状态，影响皮肤，粘膜或内脏器官。 尽管小鼠感染模型已经提供了我们对这种寄生虫感染的大部分了解，但它并不适合于大规模的探索性方法。 在我们的实验室，我们利用果蝇黑腹果蝇的易处理和强大的遗传学来建立利什曼原虫感染的模型并进行小规模的筛选来鉴定涉及的宿主基因 在这些寄生虫的吞噬中（Okuda等人，2016）。 具体而言，使用UAS-GAL4表达系统（Brand和Perrimon，1993），可能与吞噬作用相关的一组基因被特异性敲低，监测突变体感染的苍蝇的存活和寄生物负荷以鉴定 调节感染的因素。
|
|
|
| Purification of N-coronafacoyl Phytotoxins from Streptomyces scabies
|
|
Author:
Date:
2017-04-05
[Abstract] This procedure is used for large-scale purification of N-coronafacoyl phytotoxins that are produced by the potato common scab pathogen Streptomyces scabies. The procedure employs organic extraction of S. scabies culture supernatants under alternating basic and acidic conditions in order to preferentially isolate the phytotoxin - containing carboxylic acid fraction of the supernatant. Preparative thin layer chromatography and semi-preparative reverse phase - high performance liquid chromatography are then used to further purify the individual N-coronafacoyl phytotoxins of interest.
[摘要] 该方法用于大规模纯化由马铃薯常见的痂病原体耻骨链球菌sc疮产生的N， - 海胆酰基植物毒素。 该方法采用有机萃取方法。 在交替的碱性和酸性条件下培养上清液以优先分离含有上清液的含有毒素的羧酸部分。 然后使用制备型薄层色谱法和半制备型反相 - 高效液相色谱法进一步纯化所需的单独的N， - 焦油酰甲酰植物毒素。
马铃薯普通痂病是由革兰氏阳性，丝状，链霉菌属的土壤细菌引起的经济上重要的作物病。第一个描述和最好的特征是痂病引起链霉菌属（Streptomyces spp。）是具有全球分布（Bignell等人，2010）的Streptomyces scabies （syn。 S。scabiei 。目前常见的痂病治理方法包括作物轮作，灌溉和土壤熏蒸;然而，这些策略经常失败，产生不一致的结果或者环境不友好（Dees和Wanner，2012）。为了开发更好的疾病控制策略，我们必须首先了解 S使用的分子机制。 sc疮感染植物并诱发疾病症状。研究表明，S的能力。引起疾病的sc疮是由于在感染过程中产生不同作用的毒力因子。在由s生产的已知或潜在的毒力因子中。 sc疮是植物毒素的家族，被称为具有类似于植物激素茉莉酸的可能起到抑制作用的 N - 角鲨烯酰植物毒素（也称为COR-样代谢产物）病原体感染期间的植物免疫应答（Bignell等人，2010; ...
|
|
|