| Detection and Quantification of African Swine Fever Virus in MA-104 Cells
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Author:
Date:
2021-03-20
[Abstract] Detection of live African swine fever virus (ASFV) has historically relied on the use of primary swine macrophages (PSM). PSM do not replicate and have to be isolated fresh from donor swine. We previously identified that a MA-104 cells (ATCC #CRL-2378.1), a commercially available cell line isolated from African green monkey (Cercopithecus aethiops) kidney epithelial cells, supports the detection of ASFV from field samples with a sensitivity comparable to that of primary swine macrophages. Collection of swine blood or lungs is time costing, which is often not readily available in most veterinary diagnostic laboratories. MA-104 cells could thus be used as substitute for primary swine macrophages to save significant lead time by avoiding the production of primary swine macrophages. ...
[摘要] [摘要]活的非洲猪瘟病毒（ASFV）的检测在历史上一直依赖于原代猪巨噬细胞（PSM）的使用。PSM不能复制，必须从供体猪中新鲜分离。我们先前发现，MA-104细胞（ATCC＃CRL-2378.1）是一种从非洲绿猴（Cercopithecus aethiops ）肾上皮细胞分离的商业细胞系，支持从野外样品中检测ASFV，其灵敏度可与ASFV媲美。原发性猪巨噬细胞。Ç的猪的血液或肺ollection是时间成本计算，这往往是在大多数兽医诊断实验室容易获得的。MA-104细胞因此可以用作原代猪巨噬细胞的替代品，通过避免原代猪巨噬细胞的产生来节省大量的准备时间。
[背景]非洲猪瘟病毒（ASFV）的成员，非洲猪瘟病毒科的家庭，导致野猪和家猪具有高度传染性和致命性出血热，即非洲猪瘟（ASF）。成熟的病毒颗粒（病毒粒子）直径为175-215 nm，脂质双层包裹了二十面体衣壳和180-190千碱基对的双链DNA基因组。根据宿主特征和病毒株，该病毒会引起多种症状，包括高度致死性至亚临床性（Tulman等，2009 ...
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| Generation of the Compression-induced Dedifferentiated Adipocytes (CiDAs) Using Hypertonic Medium
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Author:
Date:
2021-02-20
[Abstract] Current methods to obtain mesenchymal stem cells (MSCs) involve sampling, culturing, and expanding of primary MSCs from adipose, bone marrow, and umbilical cord tissues. However, the drawbacks are the limited numbers of total cells in MSC pools, and their decaying stemness during in vitro expansion. As an alternative resource, recent ceiling culture methods allow the generation of dedifferentiated fat cells (DFATs) from mature adipocytes. Nevertheless, this process of spontaneous dedifferentiation of mature adipocytes is laborious and time-consuming. This paper describes a modified protocol for in vitro dedifferentiation of adipocytes by employing an additional physical stimulation, which takes advantage of augmenting the stemness-related Wnt/β-catenin signaling. Specifically, this ...
[摘要] [摘要]目前的方法，以获得间充质干细胞（MSC）包括采样，培养，和扩大主要由脂肪，骨髓，和脐带组织的MSCs。然而，缺点是在总细胞在MSC池，和它们的衰减干性的数量有限在维生素- [R Ò扩张。作为替代资源，最近的天花板培养方法允许从成熟的脂肪细胞中生成去分化的脂肪细胞（DFAT）。然而，这种成熟脂肪细胞自发去分化的过程既费力又费时。本文描述了一种用于经修改协议在体外通过采用附加的物理刺激，其中脂肪细胞去分化TA KES扩充所述干性相关的优点的Wnt /β-catenin信号。具体来说，该协议利用含聚乙二醇（PEG）的高渗介质引入细胞外物理刺激以获得更高的效率，并引入更简单的脂肪细胞去分化程序。
[背景]脂肪组织由于其丰度大且侵袭性相对较低，因此是间充质干细胞（MSC）最具吸引力的来源之一（Shen等，2011 ；González-Cruz等，2012； Konno等人，2013）。脂肪来源的MSC，即从皮下脂肪组织的基质血管级分中分离，已被证实同时显示多谱系潜能的体外和体内（Anghileri等人，2008;冈萨雷斯。等人，2009;冈萨雷斯-雷伊等等人，2010； Jumabay等人，2010； Mao等人，2017和2019 ；Darnell等人，2018 ...
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| Confocal Microscopy of Reovirus Transport in Living Dorsal Root Ganglion Neurons
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Author:
Date:
2020-11-20
[Abstract] Neurotropic reoviruses repurpose host machinery to traffic over long distances in neuronal processes and access distal replication sites. Understanding mechanisms of neuronal transmission is facilitated by using simplified in vitro primary neuronal culture models. Advances in the design of compartmentalized microfluidic devices lend robustness to neuronal culture models by enabling compartmentalization and manipulation of distinct neuronal processes. Here, we describe a streamlined methodology to culture sensory neurons dissociated from dorsal root ganglia of embryonic rats in microfluidic devices. We further describe protocols to exogenously label reovirus and image, track, and analyze transport of single reovirus particles in living neurons. These techniques can be adapted to study ...
[摘要] [摘要] 嗜神经性呼肠孤病毒重新利用宿主机器在神经元过程中进行长距离的传输，并进入远端复制部位。简化的体外原代神经元培养模型有助于理解神经元传递机制。室化微流控装置设计的进展使得不同的神经元过程能够被划分和操作，从而为神经元培养模型提供了稳健性。在这里，我们描述了一种在微流控装置中培养胚胎大鼠背根神经节分离的感觉神经元的方法。我们进一步描述了外源性标记呼肠孤病毒的方法，并对单个呼肠孤病毒粒子在活神经元中的转运进行了成像、跟踪和分析。这些技术可应用于研究其他嗜神经病毒的轴突定向转运以及参与信号传导和病理学的神经因子。
[背景]来自不同家族的病毒，包括黄病毒科、疱疹病毒科、小角RNA病毒科和弹状病毒科，突破神经系统的保护屏障，造成严重的疾病和经济负担（Koyuncu等人，2013年；Bohmwald等人，2018年；Tyler，2018年）。哺乳动物正呼肠孤病毒（reovirus，reovirus）属于呼肠孤病毒科，在多种年轻哺乳动物中引起血清型依赖性神经元感染，可导致致命性脑炎（Tyler等人，1986年；Dermody等人，2013年）。呼肠孤病毒没有被两个同心蛋白壳包裹的片段dsRNA基因组包裹，是研究神经系统病毒感染的一种灵活工具（Dermody等人，2013年）。虽然呼肠孤病毒感染的细胞和分子机制已被广泛地利用转化细胞系进行研究，但这些系统并不能捕捉到极化神经元细胞的复杂性。感染神经元的病毒必须在轴突中长距离传播，才能到达复制和释放的远端。为了了解呼肠孤病毒进入神经元和长距离运输的机制，我们最近采用了一些技术来培养原代神经元，并对活细胞中荧光标记的呼肠孤病毒成像（Aravamudhan等人，2020年）。 ...
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