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Date:
2020-10-20
[Abstract] Identifying microscopic mycorrhizal fungal structures in roots, i.e., hyphae, vesicles and arbuscules, requires root staining procedures that are often time consuming and involves chemicals known to present health risks from exposure. By modifying established protocols, our root staining method stains roots using a safe ink- and vinegar-based staining solution, followed by a 2-16 h-long de-staining period. The entire procedure can be completed in less than 6 h (plus up to 16 h de-staining overnight) and roots are suitable for semi-permanent and permanent slide mounting for light microscopy. We tested our method on hundreds of wild-sourced roots from two different plant species: Lycopodiella inundata, a herbaceous clubmoss with tough water-resistant roots, and Sambucus ...
[摘要] [摘要]识别根中的微观菌根真菌结构，即菌丝、囊泡和丛枝，需要根染色程序，这通常是耗时的，涉及已知的化学物质，会带来健康风险。我们建立了一套安全的染色方法，用16-h染色法对根部进行染色，然后用改良的16-h法染色。整个过程可以在不到6小时内完成（加上16小时的脱色过夜），根适合于半永久性和永久性的载玻片进行光学显微镜检查。我们对来自两种不同植物的数百根野生根进行了测试：Lycopodiella inundata（一种具有坚韧耐水根的草本灌木丛）和一种温带木本灌木Sambucus nigra。这两种植物都与内生菌根共生，水淹木主要与毛霉细根内生菌（MucFRE）共生，黑穗链霉菌与丛枝菌根真菌（AMF）共生。在这里，我们描述了一种简单、高效、可重复和安全的方法来检测真菌结构的存在。
[背景]在这里，我们详细介绍了一种有效和安全的染色方法，用于分析1305根石松（图1A）的细根内生菌（FRE）（Kowal等人，2020年）和144根桑巴（Sambucus nigra）的粗根或AMF。我们还描述了如何清洗根部进行染色，并制备半永久性的载玻片，以分析这两种广泛存在于寄主植物根系中的菌根在陆地植物系统发育中的存在与否。
已建立的鉴定菌根真菌结构的染色方法通常使用台盼蓝或氯唑黑E染料（Phillips和Hayman，1970；Ager，1991；Brundrett等人，1994），被认为是致癌的。其他研究人员描述了一种更安全的替代方法，即使用墨醋染色溶液和KOH清洗（Vierheilig等人，1998年和2005年；Wilkes等人，2019年），并对这些技术进行了比较（Vierheilig等人，2005年），但没有人用明显更细的氟利昂（菌丝宽度 ...
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