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Date:
2021-03-20
[Abstract] In this protocol, we describe a method to monitor cell migration by live-cell imaging of adherent cells. Scratching assay is a common method to investigate cell migration or wound healing capacity. However, achieving homogenous scratching, finding the optimal time window for end-point analysis and performing an objective image analysis imply, even for practiced and adept experimenters, a high chance for variability and limited reproducibility. Therefore, our protocol implemented the assessment for cell mobility by using homogenous wound making, sequential imaging and automated image analysis. Cells were cultured in 96-well plates, and after attachment, homogeneous linear scratches were made using the IncuCyte® WoundMaker. The treatments were added directly to wells and images were ...
[摘要] [摘要]在此协议中，我们描述了一种通过贴壁细胞的活细胞成像监测细胞迁移的方法。刮擦测定法是研究细胞迁移或伤口愈合能力的常用方法。然而，实现均匀的scratc兴，发现为终点analys的最佳时间窗口我S和执行目标图像分析暗示，即使对于实施，并且熟练的实验者，对变异性和有限的再现性的高机会。因此，我们的协议通过使用均质伤口制作，顺序成像和自动图像分析来实现对细胞移动性的评估。细胞在96孔板中培养，和附着后，使用进行了由均质线状痕INCUCYTE ® W¯¯ oundMaker 。将处理直接添加到孔中，每2小时自动捕获一次图像。Ť此后，对图像进行的ProCE ssed通过定义刮擦掩模，并使用细胞汇合掩模软件算法。数据分析是进行使用的INCUCYTE ®细胞迁移分析软件。因此，我们的协议允许以高度可靠，可再现和可重新分析的方式对细胞迁移的治疗效果进行时滞分析。
[背景]划痕测定小号是用于研究细胞迁移一种广泛使用的方法或伤口愈合的能力。然而，常规方法（手动刮擦）需要技能来执行线性刮擦并且是终点测定（Liang等人，2007 ；Krishnamurthy等人，2016）。通常使用Ima geJ或其他软件手动分析数据。最近，我们在细胞迁移测定中采用了Essen Bioscience的高通量自动成像系统IncuCyte ZOOM ...
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