| In-vitro GLP-1 Release Assay Using STC-1 Cells
|
|
Author:
Date:
2020-08-20
[Abstract] Enteroendocrine cells (EECs) are known chemosensors in the gastrointestinal (GI) epithelium. They release a diversity of gut hormones in response to various stimuli. Here, we report an in-vitro assay to measure GLP-1 release from cultured murine EEC’s under fatty acid stimulation.
[摘要] [摘要] 肠内分泌细胞（EEC）是胃肠道（GI）上皮中的已知化学传感器。它们响应各种刺激而释放多种肠激素。在这里，我们报告了一种体外测定法，以测量在脂肪酸刺激下培养的鼠EEC中GLP-1的释放。
[背景] 肠上皮是人体与环境之间最大的界面。该界面由单个上皮层组成，包含多个具有独特功能角色的不同细胞类型。与LGR5阳性上皮干细胞不同，肠内分泌细胞（EEC）沿整个胃肠道散布在整个上皮中。EEC通过产生和分泌多种激素，在对营养和其他刺激的反应中起关键作用。传统上，这些细胞是按照荷尔蒙特征来分类的（Nausheen 等人，2013； Latorre 等人，2016； Verhoeckx 等人，2015a），尽管随着单细胞RNA测序的到来，我们逐渐意识到这些细胞中的大多数分泌多种激素（Haber 等人，2017; Billing 等人，2019）。EEC的亚型L细胞由胰高血糖素样肽1和2（GLP-1和GLP-2）的产生定义，也可能分泌YY肽（PYY）和胰岛素样肽5（INSL5） 。大多数L细胞见于回肠末端和结肠，而另一些也见于十二指肠和空肠近端。L细胞表面的受体使它们能够直接感知管腔成分并产生适当的激素反应。L细胞上最显着的营养成分和食物成分受体是经典的味觉受体，游离脂肪酸受体以及蛋白质及其产物的受体（Drucker 和Nauck ，2006年；Furness ...
|
|
|
| Karyopherin-β2 Inhibits and Reverses Aggregation and Liquid-liquid Phase Separation of the ALS/FTD-Associated Protein FUS
|
|
Author:
Date:
2020-08-20
[Abstract] The study of RNA-binding proteins (RBP) offers insight into the mechanisms of pathologic protein aggregation in neurodegenerative diseases. We developed a protocol for purifying an RBP FUS and a nuclear import receptor (NIR) Kapβ2 and testing the ability of Kapβ2 to mitigate FUS aggregation and liquid-liquid phase separation.
[摘要] [摘要] RNA结合蛋白的研究（RBP）报价洞察病理蛋白聚集的神经变性疾病的机制。我们开发了用于纯化RBP FUS和核输入受体（NIR）Kapβ2 的协议，并测试Kapβ2 减轻FUS聚集和液-液相分离的能力。
[背景] 肌萎缩性脊髓侧索硬化症（ALS）和额颞叶痴呆（FTD）是神经变性疾病，其特征在于所述错误定位几个RNA结合蛋白的和聚集（RBP）（麦肯齐等人，2010;达克鲁斯和克利夫兰，2011； King 等，2012）。其中一种蛋白是FUS（融合在肉瘤中），一种核蛋白在ALS / FTD患者的神经元细胞质中定位不正确，然后经历液-液相转变，然后发生异常的相转变，形成不溶性聚集体（Altmeyer 等， 2015; Burke 等人，2015; Lin 等人，2015; Molliex 等人，2015; Murakami 等人，2015; Patel 等人，2015）（图1）。Karyopherin-β2（甲β2），一个核输入受体（NIR），已经建立了作为伴侣和disaggregase 蛋白与PY-核定位序列（NLS），诸如FUS（过等人，2018; Hofweber 等人。，2018;吉泽，等人。，2018）。以下方案被开发，以测试的能力甲β2抑制和反向FUS聚合和相分离的离体（过等人，2018）。
D：\ ...
|
|
|