| A Pulse–chase EdU Method for Detection of Cell Division Orientation in Arabidopsis and Juncus prismatocarpus Leaf Primordia
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Author:
Date:
2021-01-05
[Abstract] In plants, the morphological diversity of leaves is largely determined by cell division, especially cell division orientation. Whereas cell division itself is easily monitored, the detection and quantification of cell division orientation are difficult. The few existing methods for detection and quantification of cell division orientation are either inefficient or laborious. Here, we describe a pulse-chase strategy using a 5-ethynyl-2’-deoxyuridine (EdU) labeling assay. Plant tissues are first incubated with EdU for a short period (pulse), followed by a long incubation without EdU (chase). Using this method, the positions of daughter cells are easily detected and can be used to quantify cell division orientation. Our protocol is rapid and very efficient for quantitative analysis of ...
[摘要] [摘要]在植物中，叶片的形态多样性在很大程度上取决于细胞分裂，尤其是细胞分裂方向。尽管细胞分裂本身很容易监测，但是细胞分裂方向的检测和定量却很困难。现有的几种检测和定量细胞分裂方向的方法要么效率低下要么费力。在这里，我们描述了使用5-乙炔基-2'-脱氧尿苷（EdU ）标记测定的脉冲追踪策略。首先将植物组织与EdU一起短时间（脉冲）孵育，然后在没有EdU的情况下长时间孵育（追逐）。使用这种方法，子细胞的位置易于检测，可用于量化细胞分裂方向。我们的协议可以快速有效地定量分析细胞分裂方向，并且可以同时应用于模型植物和非模型植物。
图形摘要：
通过脉冲追逐EdU方法清晰可见的植物细胞分裂对
[背景]植物细胞通过细胞壁彼此附接，并且不能迁移。因此，在叶片发育的早期，组织化，定向的细胞分裂在很大程度上决定了成熟叶片的形状。迄今为止，还没有报道用于有效和快速检测和定量细胞分裂取向的方法。现有方法包括使用ap CYCB1; 1 :: GUS （β-葡萄糖醛酸糖苷酶）报告基因线（末期）可视化子核（末期）（Horiguchi et al。，2011）或使用4'，6-diamidino可视化纺锤状赤道（中期） -2-苯基吲哚（DAPI）染色（Fukushima et ...
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| Gene Expression and Genome Editing Systems by Direct Delivery of Macromolecules Into Rice Egg Cells and Zygotes
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Author:
Date:
2020-07-20
[Abstract] Polyethylene glycol calcium (PEG-Ca2+)-mediated transfection allows rapid and efficient examination to analyze diverse cellular functions of genes of interest. In plant cells, macromolecules, such as DNA, RNA and protein, are delivered into protoplasts derived from somatic tissues or calli via PEG-Ca2+ transfection. To broaden and develop the scope of investigations using plant gametes and zygotes, a procedure for direct delivery of macromolecules into these cells has recently been established using PEG-Ca2+ transfection. This PEG-Ca2+-mediated delivery into rice egg cells/zygotes consists of four microtechniques, (i) isolation of gametes, (ii) production of zygotes by electrofusion of gametes, (iii) PEG-Ca2+-mediated delivery of ...
[摘要] [摘要 ] P olyethylene乙二醇钙（PEG-的Ca 2+ ）介导的转染允许快速和有效的检查来分析感兴趣的基因的不同的细胞功能。在植物细胞中，大分子，例如DNA，RNA和蛋白质，通过PEG-Ca 2+ 转染被传递到源自体组织或愈伤组织的原生质体中。牛逼Ø拓宽和开发利用植物的配子和合子，直接递送大分子进入这些细胞最近已经采用PEG-钙建立过程调查范围2+ 转染。这种PEG-Ca 2+ 介导的传递至水稻卵细胞/受精卵的过程包括四个 微技术，（i ）配子的分离，（ii）通过配子的电融合产生合子，（iii）PEG-Ca 2+ 介导的大分子向分离的卵细胞或产生的合子的传递，以及（iv）的培养和随后的分析转染的卵细胞/受精卵。因为对于完整的协议microtechniques （我）和（ii）已在户报告等人。，2016年，microtechniques （iii）和（iv）的主要是在第描述是协议。
[背景 ] 在被子植物中，受精和随后的发育事件，诸如胚胎发生和胚乳发育，发生在深深嵌入卵形组织胚囊（Nawaschin ，1898; Guignard ，1899;罗素，1992;拉加，2003） ...
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