MgCl2

Company: Thermo Fisher

Catalog#: 10386743

Explant Culture of the Embryonic Mouse Spinal Cord and Gene Transfer by ex vivo Electroporation

Mariko Kinoshita-Kawada, Hiroshi Hasegawa, Tsunaki Hongu, Shigeru Yanagi, Yasunori Kanaho, Ichiro Masai, Takayasu Mishima, Xiaoping Chen, Yoshio Tsuboi, Yi Rao, Junichi Yuasa-Kawada and Jane Y. Wu

Published online: 2019-09-20

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Organotypic Slice Culture of the Embryonic Mouse Brain

Author:

James M. Clegg and Thomas Pratt,

Date:

2020-07-05

[Abstract] Organotypic slice culture is a powerful technique for exploring the embryonic development of the mammalian brain. In this protocol we describe a basic slice culture technique we have used for two sets of experiments: axon guidance transplant assays and bead culture assays. [摘要] [摘要]器官型切片培养是探索哺乳动物大脑胚胎发育的有力技术。在这个方案中，我们描述了一种基本的切片培养技术，我们已经用于两组实验：轴突引导移植实验和珠子培养实验。

[背景] 器官型切片培养是近年来广泛应用的一种技术，在神经发育领域已成为一种特别流行的技术。它的最大优点是可以在体外培养发育中的神经细胞，同时保持组织的体内结构。在该方案中，我们描述了我们在最近的论文（Clegg等人，2019）中用于两个实验的切片培养技术。首先，我们进行了轴突引导移植实验，将荧光标记的组织移植到非荧光宿主切片上，观察轴突的生长情况。这是先前用于研究胼胝体发育的一个改进版本，但可以很容易地用于检查其他轴突束，如丘脑皮质束（Niquille et al.，2009）。其次，我们进行了微珠培养实验，将浸有重组FGF蛋白的小球植入组织中，检测组织对FGF蛋白的分子和细胞反应。以这种方式使用浸过蛋白的小球提供了一种在特定位置聚焦输送重组蛋白的方法，与将所有组织均匀暴露于蛋白质的浴敷法不同。这模拟了体内的情况，即形态发生素（如FGF17）在特定的解剖位置表达，然后在组织中扩散。该技术可用于探索对多种不同重组蛋白或药物的反应。

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