Huh7 cells

Company: JCRB

Catalog#: JCRB0403

Cost-Effective and Reproducible Preparation of mRNA-Loaded Lipid Nanoparticles Using a Conventional Laboratory-Scale Microfluidic Assembly System

Yunqi Li, Min Wu and Ruoyang Zhao

Published online: 2025-09-20

Bio-protocol()

Company-protocol()

Other protocol()

Split Nano Luciferase-based Assay to Measure Assembly of Japanese Encephalitis Virus

Author:

Simon Goto, Kotaro Ishida, Ryosuke Suzuki and Eiji Morita,

Date:

2020-05-05

[Abstract] Cells infected with flavivirus release various forms of infectious and non-infectious particles as products and by-products. Comprehensive profiling of the released particles by density gradient centrifugation is informative for understanding viral particle assembly. However, it is difficult to detect low-abundance minor particles in such analyses. We developed a method for viral particle analysis that integrates a high-sensitivity split luciferase system and density gradient centrifugation. This protocol enables high-resolution profiling of particles produced by cells expressing Japanese encephalitis virus factors. [摘要] [ 摘要] 黄病毒感染的细胞释放出各种形式的传染性和非传染性颗粒，分别作为产物和副产物。通过密度梯度离心对释放的颗粒进行全面分析，有助于理解病毒颗粒的组装，但是很难检测到低水平的病毒颗粒。我们开发了一种将高灵敏度分裂荧光素酶系统和密度梯度离心相结合的病毒颗粒分析方法，该协议可对表达日本脑炎病毒因子的细胞产生的颗粒进行高分辨率分析。

[ 背景 ] 黄病毒是包括病毒，登革热病毒，西尼罗河病毒，tick传脑炎病毒，寨卡病毒，黄热病病毒和日本脑炎病毒（JEV）在内的一组虫媒病毒，与人类的大量发病和死亡相关（ Chambers 等人，1990）。黄病毒具有编码长多肽的单个ORF基因组，该ORF基因组在翻译后被切割成三个结构性（C，prM 和E）和七个非结构性（NS1，NS2A，NS2B，NS3，NS4A）。，NS4B和NS5）蛋白通过宿主信号肽酶和NS2B-NS3病毒蛋白酶（Chambers 等，1990）。

由NS5 RNA依赖的RNA聚合酶合成的病毒基因组RNA与C蛋白结合形成核衣壳，然后将其包装在由宿主细胞衍生的脂质膜，病毒prM 和E跨膜蛋白组成的包膜中以形成病毒体。已经发现，缺乏所有结构基因的还原型黄病毒基因组RNA被称为亚基因组复制子，可以在宿主细胞中自我复制（Suzuki ...

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