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Date:
2018-09-20
[Abstract] Stable-isotope labeled metabolic analysis is an essential methodology to characterize metabolic regulation during biological processes. However, the method using stable-isotope-labeled tracer (e.g., 13C-glucose) in live animal is only beginning to be developed. Here, we contribute a qualitative metabolic labeling experiment protocol in Drosophila melanogaster using stable-isotope-labeled 13C-glucose tracer followed by liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) analysis. Detailed experimental setup, data acquisition and analysis are provided to facilitate the application of in vivo metabolic labeling analysis that might be applied in a wide range of biological studies.
[摘要] 稳定同位素标记的代谢分析是表征生物过程中代谢调节的基本方法。 然而，在活体动物中使用稳定同位素标记的示踪剂（例如， 13 C-葡萄糖）的方法才刚刚开始开发。 在这里，我们使用稳定同位素标记的 13 C-葡萄糖示踪剂，然后通过液相色谱 - 质谱（LC-MS）在 Drosophila melanogaster 中提供定性代谢标记实验方案。 分析。 提供详细的实验设置，数据采集和分析以促进体内代谢标记分析的应用，其可以应用于广泛的生物学研究中。
【背景】代谢组学是一项新兴的omic-level研究，旨在研究复杂生物系统中的小分子代谢物。它已被应用于与人类健康和疾病有关的各种研究领域，例如生物标志物发现，疾病发病机理和药物毒性评估。代谢物的测量对于确定响应内源和外源变化的代谢途径的改变是重要的。为了准确表征代谢途径活动，已使用同位素标记的示踪剂（例如， 13 C和 15 N）（Park et al。，2016; Jang et al。，2018）。在培养的细胞中有许多这样的研究（定量和定性）（Buescher et al。，2015; Liu et al。，2018），然而，基于稳定同位素的研究活体动物的代谢标记实验在很大程度上尚未开发。在目前的方案中，我们描述了使用标记的 13 ...
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