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Rotor S-4-104, incl. 4 × 750 mL round buckets

Company: Eppendorf
Catalog#: 5820740000
Bio-protocol()
Company-protocol()
Other protocol()

Ty1 Retrotransposition Frequency Assay Using a Chromosomal Ty1his3AI or Ty1kanMXAI Element
Author:
Date:
2018-09-05
[Abstract]  Here I describe a simple genetic assay to determine the frequency of retrotransposition of a single chromosomal Ty1 element that is marked with the retrotransposition indicator gene, his3AI or kanMXAI. The assay is used to determine the effect of mutations or environmental conditions on the frequency of Ty1 retrotransposition in the yeast, Saccharomyces cerevisiae. [摘要]  在这里,我描述了一个简单的基因测定,以确定单个染色体Ty1元件的逆转录频率,该元件用逆转录指示基因 his3AI 或 kanMXAI 标记。 该测定用于确定突变或环境条件对酵母中的Ty1逆转录频率的影响, Saccharomyces cerevisiae 。

【背景】Ty1是长末端重复(LTR)反转录转座子,其在结构上和进化上与逆转录病毒相关。当Ty1 RNA在细胞质病毒样颗粒内逆转录时,Ty1的逆转录发生,导致cDNA的合成,转运回细胞核并整合到其宿主的基因组中(Boeke et al。 ,1985; Garfinkel et al。,1985)。整合的Ty1元件包含两个相同方向的LTR,位于两个开放阅读框的侧翼: GAG ,它编码形成病毒样颗粒并结合Ty1 RNA的结构蛋白, POL ,它编码三种酶蛋白 - 蛋白酶,逆转录酶和整合酶(图1)。 Ty1元素是 S中所有五个LTR-反转录转座子家族中最活跃和最丰富的转录。酵母。 Ty1已被证明受数百种基因,几种不同的环境条件和各种DNA损伤剂的调节(Curcio et ...

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