|
Author:
Date:
2018-09-05
[Abstract] Cell synchronization is widely used in studying mechanisms involves in regulation of cell cycle progression. Through synchronization, cells at distinct cell cycle stage could be obtained. Thymidine is a DNA synthesis inhibitor that can arrest cell at G1/S boundary, prior to DNA replication. Here, we present the protocol to synchronize cells at G1/S boundary by using double thymidine block. After release into normal medium, cell population at distinct cell cycle phase could be collected at different time points.
[摘要] 细胞同步广泛用于研究涉及细胞周期进程调节的机制。 通过同步，可以获得不同细胞周期阶段的细胞。 胸苷是一种DNA合成抑制剂，可在DNA复制前阻止细胞在G1 / S边界。 在这里，我们提出了使用双胸苷阻滞同步G1 / S边界细胞的协议。 释放到正常培养基中后，可以在不同的时间点收集不同细胞周期阶段的细胞群。
【背景】细胞周期和细胞分裂是细胞生物学的核心。为了构建多细胞生物体，细胞复制对于产生可以执行特定功能的特化细胞是必需的。正常细胞周期由间期（G1期，S期和G2期）和有丝分裂期（M期）组成（Rodríguez-Ubreva et al。，2010;Léger et al。 ，2016）。在间期期间，遗传物质被复制并使一切为有丝分裂做好准备。然而，在有丝分裂期，重复的染色体被分离并分配到子细胞中（Sakaue-Sawano 等人，，2008）。
为了精确保存遗传信息，必须严格控制细胞周期进程。细胞周期蛋白/ CDK复合物通过在各自阶段快速促进活动来控制细胞周期进展，并且当它们的阶段完成时迅速失活（Graña和Reddy，1995）。
细胞同步对于研究细胞周期调节事件特别有用。使用不同的方法，细胞可以在不同的细胞周期阶段同步。治疗作为微管形成抑制剂的诺考达唑可以使细胞处于G2 / M期同步（Ho et ...
|