{{'Search' | translate}}
 

Eppendorf µCuvette® G1.0 and Eppendorf BioSpectrometer® basic

Company: Eppendorf
Catalog#: 6135000904
Bio-protocol()
Company-protocol()
Other protocol()

Isothermal Titration Calorimetry: A Biophysical Method to Characterize the Interaction between Label-free Biomolecules in Solution
Author:
Date:
2018-08-05
[Abstract]  This protocol can be applied to analyze the direct interaction between a soluble protein and a target ligand molecule using Isothermal Titration Calorimetry (ITC, Malvern). ITC allows the biophysical characterization of binding between label-free, non-immobilized and in-solution biomolecules by providing the stoichiometry of the interaction, the equilibrium binding constants and the thermodynamic parameters. ITC monitors heat changes (released and/or absorbed) caused by macromolecular interactions with no restrictions of buffer and molecular weight of the macromolecules. [摘要]  该方案可用于使用等温滴定量热法(ITC,Malvern)分析可溶性蛋白质和靶配体分子之间的直接相互作用。 ITC允许通过提供相互作用的化学计量,平衡结合常数和热力学参数来对无标记,非固定和溶液内生物分子之间的结合进行生物物理表征。 ITC监测由大分子相互作用引起的热变化(释放和/或吸收),而不限制大分子的缓冲液和分子量。

【背景】大分子相互作用是关键的细胞事件,因为它们形成信号转导途径的基础。因此,大分子相互作用是研究的重要领域,因为它们允许更深入地理解作为生理学和病理生理学过程基础的分子机制,以及能够调节引起疾病的大分子结合事件的药物的合理设计。

在这种情况下,等温滴定量热法(ITC)是一种用于表征大分子相互作用的强大技术。 ITC确定两个分子结合时发生的热变化。可以吸收热量(吸热反应)或释放(放热反应)。 ITC通过确定由仪器的加热器提供给参比和样品池的差异功率来监测这种热变化,这是在结合反应期间抵消两个电池之间的任何温差所需的,使得参考之间没有温度差异。和样品细胞(图1)。

...

Comments