|
Author:
Date:
2018-06-20
[Abstract] The mucosal surfaces of the gastrointestinal, respiratory, reproductive, and urinary tracts, and the surface of the eye harbor a resident microflora that lives in symbiosis with their host and forms a complex ecosystem. The protection of the vulnerable epithelium is primarily achieved by mucins that form a gel-like structure adherent to the apical cell surface. This mucus layer constitutes a physical and chemical barrier between the microbial flora and the underlying epithelium. Mucus is critical to the maintenance of a homeostatic relationship between the microbiota and its host. Subtle deviations from this dynamic interaction may result in major implications for health. The protocol in this article describes the procedures to grow low mucus-producing HT29 and high mucus-producing ...
[摘要] 胃肠道，呼吸道，生殖道和泌尿道的粘膜表面以及眼睛表面都有一个居住的微生物群落，它们与宿主共生并形成一个复杂的生态系统。脆弱的上皮细胞的保护主要通过形成附着于顶端细胞表面的凝胶样结构的粘蛋白实现。该粘液层构成了微生物菌群和下层上皮之间的物理和化学屏障。粘液对维持微生物群与宿主之间的稳态关系至关重要。与这种动态互动的细微差异可能会对健康产生重大影响。本文中的方案描述了生长低粘液产生HT29和高粘液产生HT29-MTX-E12细胞的程序，维持细胞并通过ELISA将其用于粘液定量。此外，还介绍了如何评估分泌黏液的数量。该系统可用于研究粘液对抗细菌毒素的保护作用，例如测试不同培养条件对粘液产生的影响或分析分子通过粘液层的扩散。由于本方案中使用的ELISA可用于不同的物种和粘液蛋白，因此也可以使用其他细胞类型。
【背景】身体与外部环境的界面由粘膜表面形成。这些粘膜上皮组织可以在例如胃肠道，呼吸道，生殖道和尿道以及眼睛表面发现。由于它们暴露于外部环境中，许多微生物会聚集在这些组织中。因此，这些上皮细胞已经进化出多种防御机制来回应其易受微生物攻击的影响。许多防御性化合物被分泌到粘膜液中，包括粘蛋白，抗体，防御素，protegrin，聚集蛋白，cathelicidins，溶菌酶，组蛋白和一氧化氮（Kagnoff和Eckmann，1997，Lu等人，2002 ...
|