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Author:
Date:
2018-06-05
[Abstract] Studying lipid metabolism in cultured cells is complicated by the fact that cells are typically cultured in the presence of animal serum, which contains a wide, variable, and undefined variety of lipid species. Lipid metabolism can impact cell physiology, signaling, and proliferation, and the ability to culture cells in the absence of exogenous lipids can reveal the importance of lipid biosynthesis pathways and facilitate the generation of media with defined lipid species. We have adapted a protocol to remove lipids from serum without eliminating its ability to support the proliferation of cells in culture. This method requires di-isopropyl ether and butanol and can be used to generate small batches of lipid-stripped serum in four days. The resulting serum supports proliferation of many ...
[摘要] 研究培养细胞中的脂质代谢很复杂，因为细胞通常在动物血清存在的情况下进行培养，动物血清含有广泛的，可变的和不确定的脂质种类。 脂质代谢可以影响细胞生理学，信号传导和增殖，并且在不存在外源脂质的情况下培养细胞的能力可以揭示脂质生物合成途径的重要性并促进具有限定的脂质物种的培养基的生成。 我们已经调整了一个方案，以去除血清中的脂质，而不消除其支持培养物中细胞增殖的能力。 该方法需要二异丙醚和丁醇，并且可以在四天内用于生成小批量的脂质剥离血清。 所得血清支持培养中许多细胞系的增殖，并且可用于比较脂质充足和贫化条件下细胞的代谢。
【背景】脂质是细胞膜的主要成分，其描绘生物区室，并且在信号传导途径和能量储存中发挥重要作用（Baenke等人，2013）。脂质代谢在多种疾病中失调，最近的研究表明破坏脂质生物合成可能是抑制肿瘤生长的一种方法（Svensson和Shaw，2016）。因此，有兴趣研究产生细胞脂质物种的代谢途径。在没有特定代谢组分的培养基中培养细胞可以帮助更好地理解代谢途径如何支持细胞功能。大多数哺乳动物细胞的标准培养基包括动物血清作为蛋白质和生长因子（最常见的是胎牛血清[FBS]）的来源。动物血清在脂蛋白复合物中含有多种脂质物质并与血清白蛋白结合。不同批次的动物血清组成不同，在大多数实验中血清中的营养物质水平没有明确定义。细胞能够从合成和外源来源获得脂质（Kamphorst等人，2013; ...
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