| Analysis of Generalized Fibrosis in Mouse Tissue Sections with Masson’s Trichrome Staining
|
|
Author:
Date:
2020-05-20
[Abstract] Expansion of fibrous connective tissue and abnormal deposition of extracellular matrix (ECM) are at the basis of many fibrotic diseases. Fibrosis can occur in response to both physiological and pathological cues, including wound healing, tissue remodeling/repair and inflammation. Chronic fibrosis can lead to severe tissue damage, organ failure and death. Assessing the extent of organ fibrosis is crucial for accurate diagnosis of this condition. The use of Masson’s trichrome staining of tissue sections from skeletal muscle is a fast method for detection of morphological alterations indicative of a fibrotic phenotype in this organ. This staining method detects the extent of collagen fibers deposition and, because it employs the combination of three dyes, can also distinguish muscle fibers ...
[摘要] [摘要 ] 纤维结缔组织扩张和细胞外基质异常沉积是许多纤维化疾病的基础。纤维化可响应生理和病理学提示而发生，包括伤口愈合，组织重塑/修复和炎症。慢性纤维化可导致严重的组织损伤，器官衰竭甚至死亡。评估器官纤维化的程度对于准确诊断这种情况至关重要。使用Masson的骨骼肌组织切片进行三色染色是检测指示该器官纤维化表型的形态学改变的快速方法。这种染色方法可检测胶原纤维的沉积程度， 因为它使用三种染料的组合，所以还可以同时区分肌肉纤维（红色）和胶原蛋白（蓝色）和细胞核（黑色）。
[背景] 纤维化是由于慢性炎症，组织损伤/重塑（例如，化学或放射疗法后），持续感染，自身免疫性疾病，过敏反应和癌症而在器官中形成过多的纤维结缔组织。在此过程中，包括胶原蛋白在内的过多的细胞外基质（ECM）成分会沉积并积聚。如果进展，纤维化将变成慢性，最终导致器官衰竭甚至死亡（Rockey 等，2015）。塞弗拉尔类型的纤维化疾病在人类，很多都是未知病因进行了描述。通常受影响的器官是肺，肾，肝，心脏和骨骼肌（Hinderer 等人，2019年; Majo 等人，2019年; Mahdy，2019年）。例如，特发性肺纤维化是与肺组织瘢痕形成有关的常见，进行性和致命性疾病，会逐渐失去充氧能力，导致患者无法正常呼吸（Lederer 等人，2018）。
...
|
|
|
| Expansion of Airway Basal Cells and Generation of Polarized Epithelium
|
|
Author:
Date:
2018-06-05
[Abstract] Airway basal stem cells are the progenitor cells within the airway that exhibit the capacity to self-renew and give rise to multiple types of differentiated airway epithelial cells. This stem cell-derived epithelium displays organized architecture with functional attributes of the airway mucosa. A protocol has been developed to culture and expand human airway basal stem cells while preserving their stem cell properties and capacity for subsequent mucociliary differentiation. This achievement presents a previously unrealized opportunity to maintain a durable supply of progenitor cells derived from healthy donors to differentiate into human primary airway epithelium for cellular and molecular-based studies. Further, basal stem cells can be harvested from patients with a specific airway ...
[摘要] 气道基底干细胞是气道内的祖细胞，表现出自我更新的能力并产生多种类型的分化的气道上皮细胞。这种干细胞来源的上皮细胞显示出具有气道粘膜功能属性的有组织的结构。已经开发了一种方案来培养和扩展人气道基底干细胞，同时保持其干细胞特性和后续粘液分泌的能力。这项成就提供了一个以前未实现的机会，以保持源自健康供体的祖细胞的持久供应，以分化为用于基于细胞和分子的研究的人原发性气道上皮。此外，基底干细胞可以从患有特定气道疾病的患者（例如囊性纤维化）中收集，从而能够在适当的气道粘膜环境下研究疾病特异性细胞的潜在改变的行为。在这里，我们详细描述了一系列气道基底干细胞系列扩增的方案，以实现几乎无限制的气道基底细胞的生成，这些细胞可以储存并随时用于随后的培养和分化。此外，我们描述了气液基底干细胞在空气 - 液体界面处的可渗透Transwell过滤器上的培养和分化，以创建功能性粘膜睫毛伪分层极化气道上皮粘膜。
【背景】气道疾病建模和药物发现已经从在气液界面（ALI）的可渗透Transwell过滤器上生长的原代呼吸道上皮培养物的开发和使用中获益。与永生化细胞系相比，该模型具有几个优点，即原代上皮细胞可以分化成具有多种上皮细胞类型（包括纤毛，浆膜和基底细胞）的气道粘膜，并且它们的排列在体内是相当反映的蜂窝组织。主要的ALI模型表现出功能性微生理过程，包括跳动纤毛和分泌粘液的能力，这些特征在细胞系衍生的上皮单层中显着不存在。此外，原代细胞不依赖于人工永生化或转化，因为细胞系来源的上皮细胞确实存在，因此不受细胞系中可能发生的错误信号传导的阻碍，这可能会错误地表示气道上皮中发生的过程。尽管有这些显着的限制，永生化细胞系被广泛用于模拟和研究气道上皮细胞，因为原发性气道上皮细胞存在自己的一系列挑战。原代上皮细胞在传代数次后无法复制，必须连续收获并分离以完成每组研究。另外，改变或缺失感兴趣基因表达的分子生物学技术难以实现，并且与原代上皮细胞一起维持。这些缺点造成成本和技术障碍，阻碍了原发性ALI培养物的广泛使用，尽管它们在调查气道粘膜方面有明显优势。 ...
|
|
|