| Rice Ragged Stunt Virus Propagation and Infection on Rice Plants
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Author:
Date:
2018-10-20
[Abstract] Virus inoculation is a basic experimental procedure to evaluate the resistance of a rice variety or a transgenic material upon virus infection. We recently demonstrated that Rice Ragged Stunt Virus (RRSV), an oryzavirus that is transmitted by brown planthopper (BPH), can suppress jasmonic acid-mediated antiviral defense through the induction of microRNA319 and facilitate virus infection in rice. To verify this, we performed virus inoculation experiments on wild-type rice plants and miR319-TCP21-associated transgenic rice plants through a modified group inoculation method. Here, we presented the detailed procedure of RRSV propagation and infection process on rice plants.
[摘要] 病毒接种是评估水稻品种或转基因材料对病毒感染的抗性的基本实验程序。 我们最近证明，由褐飞虱（BPH）传播的 Rice Ragged Stunt Virus >（RRSV）是一种 oryzavirus >，可以通过诱导抑制茉莉酸介导的抗病毒防御 microRNA319并促进水稻中的病毒感染。 为了验证这一点，我们通过改良的组接种方法对野生型水稻植物和miR319-TCP21相关的转基因水稻植物进行了病毒接种实验。 在这里，我们介绍了水稻植物RRSV繁殖和感染过程的详细程序。
【背景】研究病毒发病机制和筛选抗病毒水稻品种已经在克服水稻病毒病和保持粮食安全方面做了大量工作。 在该领域中，病毒接种是评估转基因材料或水稻品种的抗性的必要且可靠的方法。 水稻粗糙特技病毒>（RRSV）可以在许多亚洲国家以持续繁殖的方式通过褐飞虱传播水稻褴褛特技病（Ling et al。>，1978; Hibino，1979）。 两种经典方法，包括单苗接种和组接种，已用于进行病毒接种实验（Zhang et al。>，2013）。 通过修改传统的群体接种方法，我们提供了一种与自然感染条件非常相似的便捷方法。
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| Detecting the Interaction of Double-stranded RNA Binding Protein, Viral Protein and Primary miRNA Transcript by Co-immunoprecipitation in planta
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Author:
Date:
2018-05-05
[Abstract] MicroRNAs (miRNAs) play important roles in plant growth, development, and response to infection by microbes. Double-stranded RNA binding protein 1 (DRB1) facilitates the processing of primary miRNA transcripts into mature miRNAs. Recently, we found that NS3 protein encoded by rice stripe virus (RSV) associates with DRB1 and promotes miRNA biogenesis during RSV infection (Zheng et al., 2017). RNA co-immunoprecipitation (RIP) method was applied to identity association patterns among DRB1, NS3, and miRNA transcript.
[摘要] 微小RNA（miRNA）在植物生长，发育和微生物感染反应中发挥重要作用。 双链RNA结合蛋白1（DRB1）有助于将初级miRNA转录物加工成成熟的miRNA。 最近，我们发现水稻条纹病毒（RSV）编码的NS3蛋白与DRB1相关并促进RSV感染期间的miRNA生物合成（Zheng等人，2017）。 RNA共免疫沉淀（RIP）方法被用于鉴定DRB1，NS3和miRNA转录物之间的关联模式。
【背景】在双链RNA（dsRNA）结合蛋白HYPONASTIC LEAVES1（DRB1 / HYL1）的帮助下，通过RNA酶III酶DICER-LIKE1（DCL1）从其初级转录物（pri-miRNA） 锌指蛋白SERRATE（SE）。 水稻条纹病毒（RSV）感染广泛地干扰miRNA积累。 我们发现RSV编码的非结构蛋白3（NS3）通过与水稻中的DRB1相互作用下调pri-miRNAs来促进miRNA积累（Zheng等人，2017）。 为了揭示NS3如何增强pri-miRNA的加工，我们使用免疫共沉淀（Co-IP）来说明NS3，DRB1和pri-miRNA体内的关系。 该协议有助于了解两种蛋白质和一种RNA转录本之间的关联模式。
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