Protocol to Test the Effect of Sorbitol in vitro on Hybrid Larch (Larix x eurolepis Henry) Emblings
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Author:
Date:
2018-07-20
[Abstract] This protocol presents a method to test the effect of sorbitol in vitro on hybrid larch plants derived from somatic embryogenesis. We have tested four different media variants, one control variant without sorbitol and three variants of decreasing water potential corresponding to sorbitol concentrations in the culture medium of 4%, 10%, and 20%. We cultured two hybrid larch clones on these media during 35 days and assessed their vitality and weight growth after this time.
[摘要] 该方案提供了一种测试山梨醇体外对体细胞胚胎发生的杂交落叶松植物的影响的方法。 我们测试了四种不同的培养基变体,一种不含山梨糖醇的对照变体和三种降低水势的变体,对应于培养基中山梨糖醇浓度为4%,10%和20%。 我们在35天内在这些培养基上培养了两个杂交落叶松克隆,并在此之后评估它们的活力和体重增长。
【背景】林木育种可受益于允许在其发育的早期阶段对植物系进行高通量筛选的方法。这些方法有助于界定后期在田间测试的基因型的数量,这是在林木物种需要相当大的空间的情况下的问题。一种可能性是在体外测试幼苗,该过程具有促进均匀和良好控制的实验条件的额外优点。对生物和非生物胁迫因子的耐受性的方面可以例如在体外进行筛选。其中,干旱压力在改善计划中受到特别关注。模拟缺水的常用方法是在根部支持培养基中添加渗透压,从而降低水的可用性。渗透压剂可以是离子型NaCl或非离子型甘露醇,山梨糖醇或PEG(聚乙二醇)(Singh和Singh,2015)。我们已经开发出一种方案,该方案允许测试山梨糖醇在体外对来自体细胞胚胎发生的杂交落叶松嵌入的影响。
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Magnetic Resonance Imaging and Histopathological Visualization of Human Dural Lymphatic Vessels
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Author:
Date:
2018-04-20
[Abstract] In this protocol, we describe a method to visualize and map dural lymphatic vessels in-vivo using magnetic resonance imaging (MRI) and ex-vivo using histopathological techniques. While MRI protocols for routine imaging of meningeal lymphatics include contrast-enhanced T2-FLAIR and T1-weighted black-blood imaging, a more specific 3D mapping of the lymphatic system can be obtained by administering two distinct gadolinium-based MRI contrast agents on different days (gadofosveset and gadobutrol) and subsequently processing images acquired before and after administration of each type of contrast. In addition, we introduce methods for optimal immunostaining of lymphatic and blood vessel markers in human dura mater ex-vivo.
[摘要] 在该协议中,我们描述了一种使用组织病理学技术使用磁共振成像(MRI)和体外可视化和绘制硬膜淋巴管体内的方法。 虽然用于脑膜淋巴管的常规成像的MRI方案包括对比增强的T2-FLAIR和T1加权的黑血成像,但是可以通过在不同日期施用两种不同的基于钆的MRI造影剂来获得更具体的淋巴系统3D图谱 (gadofosveset和钆布醇)并且随后处理在施用每种类型的对比之前和之后采集的图像。 此外,我们介绍了在人体硬脑膜内进行淋巴和血管标志物最佳免疫染色的方法。
【背景】在大脑免疫特权的原因是没有实质淋巴管。 然而,最近的研究发现了啮齿动物硬脑膜中广泛的淋巴循环系统(Aspelund等人,2015; Louveau等人,2015),提供了可能的途径 用于消除大脑的废物和免疫细胞进入深部颈部淋巴结。 在这个协议中,我们描述了一种方法来:(1)使用MRI的头部显示硬脑膜内的淋巴管体内,和(2)使用优化评估淋巴管的局部存在 免疫染色方法(Absinta等人,2017)。 淋巴管的体内成像可以更详细地研究废物清除和免疫功能的机制及其在各种疾病和衰老中的潜在异常。
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