| Assays for Oxidative Responses of Fusarium graminearum Strains to Superoxide Radicals
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Author:
Date:
2018-09-05
[Abstract] The ascomycete fungus Fusarium graminearum is a major causal agent of Fusarium head blight (FHB), a devastating disease affecting small grains cereals worldwide. To better understand the pathogenesis of this fungus, we provide here an easy-to-use protocol to examine the sensitivity of the wild-type and mutant strains of F. graminearum to oxidative stress from superoxide anions (O2•-) generated by menadione. Similarly, this assay can also be used to detect other stress responses of different fungal strains to various stress agents. The change in stress response of a mutant can offer a clue for the biological function of mutated genes.
[摘要] 子囊菌真菌 Fusarium graminearum 是 Fusarium 头枯病（FHB）的主要致病因子，FHB是一种影响全世界小粒谷物的破坏性疾病。 为了更好地了解这种真菌的发病机理，我们在此提供了一种易于使用的方案来检测 F的野生型和突变株的敏感性。 禾谷镰刀菌对由甲萘醌产生的超氧阴离子（O2 • - ）的氧化应激。 类似地，该测定也可用于检测不同真菌菌株对各种应激物的其他应激反应。 突变体的应激反应的变化可以为突变基因的生物学功能提供线索。
【背景】子囊菌真菌 Fusarium graminearum （以前也被称为 Gibberella zeae 的性状）不仅是 Fusarium 头枯病和幼苗的主要致病因子小麦和大麦枯萎病，也是玉米赤霉病茎腐病的重要致病因子之一（Dal Bello et al。，2002; Bai and Shaner，2004; Kazan et al。，2012）。除了导致谷物大量减产外，这种真菌还会产生影响人类和动物健康的真菌毒素。因此，这种真菌受到广泛关注，在所有研究的植物病原真菌中排名第四（Dean et al。，2012）。
F。禾本科植物对死有机物进行过冬，特别是对受感染的小粒和玉米作物残留物进行过度研究。为了在如此广泛的环境中生存， F. graminearum ...
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| Enzymatic Activity Assay for Invertase in Synechocystis Cells
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Author:
Date:
2018-05-20
[Abstract] Invertase can catalyze the hydrolysis of sucrose, and is widely distributed in cells of cyanobacteria and plants. Being responsible for the first step for sucrose metabolism, invertase plays important physiological roles and its enzymatic activity is frequently needed to be determined. All the methods for determination of the invertase activity are dependent on detection of the glucose product generated by the invertase. Here we describe an ion chromatography based protocol of our laboratory for determination of cyanobacterial intracellular invertase activity.
[摘要] 转化酶可催化蔗糖的水解，广泛分布于蓝细菌和植物细胞中。 负责蔗糖代谢的第一步，转化酶起着重要的生理作用，其酶活性经常需要确定。 所有测定转化酶活性的方法都依赖于转化酶产生的葡萄糖产物的检测。 在这里我们描述了我们的实验室用于测定蓝细菌细胞内转化酶活性的基于离子色谱的方案。
【背景】转化酶和蔗糖在蓝细菌中发挥重要的生理作用（Curatti，et al。，2008; Kolman等人，2015）和高等植物（Vargas等人， ，2003; Vargas et。，2010）。转化酶（EC 3.2.1.26）可以催化蔗糖降解成葡萄糖和果糖。由于转化酶的这种特性，任何可用于测定葡萄糖或果糖的方法理论上都将用于转化酶酶活性测定。实际上，大多数转化酶酶活性测定基于检测产生的葡萄糖产物。
一些公司已经开发了用于转化酶活性测定的几种试剂盒，例如来自abcam（USA）的ab197005，来自Novus Biologicals（USA）的KA1629，来自Sigma-Aldrich（USA）的MAK118。通过使用这些试剂盒，由转化酶反应产生的葡萄糖产物将被氧化并通过比色（570nm）或荧光法（λem/ ex = 585 / ...
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| Determination of Intracellular Osmolytes in Cyanobacterial Cells
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Author:
Date:
2018-04-20
[Abstract] Most of the cyanobacteria accumulate osmolytes including sucrose, glucosylglycerol, in their cells in response to salt stress. Here we describe a protocol of our laboratory for extraction and quantification of cyanobacterial intracellular sucrose and glucosylglycerol. We have confirmed this protocol was applicable to at least four kinds of cyanobacteria, filamentous cyanobacterium Anabaena sp. PCC 7120, unicellular cyanobacterium Synechocystis sp. PCC 6803, Synechococcus elongatus PCC 7942 and halotolerant unicellular cyanobacterium Synechococcus sp. PCC 7002.
[摘要] 大多数蓝细菌在其细胞中积累包括蔗糖，葡萄糖基甘油在内的渗透压以响应盐胁迫。 在这里，我们描述了我们实验室的蓝藻细胞内蔗糖和葡萄糖甘油的提取和定量方案。 我们已证实此方案适用于至少四种蓝藻，丝状蓝藻Anabaena sp。 PCC 7120，单细胞蓝藻集胞藻 sp。 PCC 6803，细长聚球蓝细菌PCC 7942和耐盐单细胞蓝细菌聚球蓝细菌。 PCC 7002。【背景】Osmolytes（或相容溶质）是一组低分子量的有机溶质，对包括蓝细菌在内的微生物的非生物胁迫适应具有重要的生理作用（Reed和Stewart，1985;Klähn和Hagemann，2011; Slama等人。，2015）。为了确定来自蓝细菌细胞的细胞内渗透物，已经建立了几种方案（Reed和Stewart，1985; Hagemann等人，1997; Motta等人，2004; Du ，2013; Fa et al。，2015）。在这些方法中，基于核磁共振（NMR）光谱的方法是唯一可以直接应用于微生物培养物而不需要任何提取程序的方法（Motta等人，2004年）。然而，这个方案刚刚在Halomonas pantelleriensis 和Sulfolobus solfataricus ...
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