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Flaming/Brown Micropipette Puller

Company: Sutter Instruments
Catalog#: P-97
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Company-protocol()
Other protocol()

Combinations of Patch-Clamp and Confocal Calcium Imaging in Acutely Isolated Adult Mouse Amygdala Brain Slices
Author:
Date:
2018-08-05
[Abstract]  Calcium imaging is a powerful technique in the study of neuronal physiology, as it avoids the enzyme treatment on neurons and is able to study the neuronal activities in vivo. Using calcium-imaging techniques, we are able to monitor the elevation of calcium in the neuron. Furthermore, we can combine calcium imaging with other methods, like whole-cell patch clamp recordings, to detect a single cell calcium signal in brain slices. In this protocol, we describe a detailed confocal imaging method that is combined with whole-cell patch clamp configuration using brain slices (Du et al., 2017). [摘要]  钙成像是神经生理学研究中的一项强有力的技术,因为它避免了对神经元的酶处理,并且能够研究体内的神经元活动。 使用钙成像技术,我们能够监测神经元中钙的升高。 此外,我们可以将钙成像与其他方法结合起来,如全细胞膜片钳记录,以检测脑切片中的单细胞钙信号。 在该协议中,我们描述了一种详细的共焦成像方法,该方法与使用脑切片的全细胞膜片钳配置相结合(Du et al。,2017)。

【背景】几十年来,脑切片已成功用于研究突触,神经元和神经回路。许多实验操作已经应用于脑切片模型,例如药物应用,细胞内记录和光学成像。与培养的神经元相比,脑切片保留了神经元回路的许多基本功能特性。钙成像是一种广泛使用的技术,旨在表明分离的细胞和组织的细胞内钙(Ca 2 + )状态。研究脑组织中的细胞内钙可以深入了解各种生理过程,如细胞增殖,信号转导,突触可塑性和细胞死亡,因为钙浓度在这些功能中起着关键作用(Cameron et al。,2016)。钙指示剂是一种荧光分子,它与Ca 2 + ...

Embryonic Intravitreous Injection in Mouse
Author:
Date:
2018-07-20
[Abstract]  Axons of retinal ganglion cells (RGCs) relay visual information from the retina to lateral geniculate nucleus (LGN) and superior colliculus (SC), which are two major image-forming visual nuclei. Wiring of these retinal projections completes before vision begins. However, there are few studies on retinal axons at embryonic stage due to technical difficulty. We developed a method of embryonic intravitreous injection of dyes in mice to visualize retinal projections to LGN and SC. This study opens up the possibility of understanding early visual circuit wiring in mice embryos. [摘要]  视网膜神经节细胞(RGC)的轴突将视觉信息从视网膜传递到外侧膝状核(LGN)和上丘(SC),这是两个主要的成像视觉核。 在视力开始之前完成这些视网膜投射的布线。 然而,由于技术困难,很少有关于胚胎期视网膜轴突的研究。 我们开发了一种胚胎玻璃体内注射染料的方法,用于观察LGN和SC的视网膜投射。 这项研究开辟了理解小鼠胚胎早期视觉电路布线的可能性。

【背景】早在胚胎第14.5天(E14.5)小鼠中,视网膜轴突开始向LGN和SC投射。 为了研究胚胎中的轴突投射,需要在注射手术前保持胚胎存活至少10小时,玻璃内注射染料。 以前的研究表明,胚胎可以使用含氧小鼠血清进行体外培养。 然而,营养多样性,氧饱和度和温度调节等问题会影响胚胎的生理状况。 在我们的研究中,我们通过胚胎中的子宫壁和眼睑进行玻璃体内注射,并在注射后将它们保存在子宫中。 从E15.5到E18.5很好地标记了对LGN和SC的视网膜轴突投射。

Intra-amniotic Injection of Mouse Embryos
Author:
Date:
2018-05-20
[Abstract]  Recent outbreaks of infectious neuro-developmental diseases such as congenital Zika syndrome - have led to a demand for prognosis data from animal models. We developed an intra-amniotic injection mice model that allows Zika virus (ZIKV) infected mice to grow to puberty. In this system, ZIKV is injected into the amniotic fluid of pregnant mice and infected embryos thereafter. ZIKV-infected mice show several symptoms of clinical ‘congenital Zika syndrome’, including decreased brain volume and mis-laminated retina. We also evaluated several behavioral functions of these ZIKV-infected mice, for example, after the mice reach puberty, they have visual and motor defects. This technique can be used to screen and evaluate drug candidates and may help evaluate the prognosis of infectious ... [摘要]  最近爆发的传染性神经发育疾病,例如先天性寨卡综合征 - 已经导致对来自动物模型的预后数据的需求。 我们开发了羊膜内注射小鼠模型,其允许寨卡病毒(ZIKV)感染的小鼠生长至青春期。 在此系统中,ZIKV被注入怀孕小鼠的羊水中,然后感染胚胎。 ZIKV感染的小鼠显示出临床'先天性Zika综合征'的几种症状,包括脑容积减少和视网膜错层。 我们还评估了这些ZIKV感染小鼠的几种行为功能,例如,在小鼠到达青春期后,它们具有视觉和运动缺陷。 这种技术可用于筛选和评估候选药物,并有助于评估感染性神经发育疾病的预后。

【背景】自第一例人感染ZIKV病例以来,已有60多年的历史,但2007年仅记录了14例ZIKV感染的人类病例。 预后数据远远落后于2015年最近爆发的ZIKV。有证据表明小鼠模型可能对预后研究有效,因为之前的报道证明ZIKV在小鼠中的神经毒性。 因此,ZIKV感染的各种方法包括静脉注射,腹腔注射,足垫注射和脑注射已被用于研究胚胎期或婴儿期期间个体的先天性寨卡综合征。 这里给出的羊膜内注射模型具有两个有利的特征。 首先,可以使用野生型小鼠(C57 BL / 6J),并且研究不限于具有免疫缺陷的小鼠。 其次,ZIKV感染的小鼠可长成青春期,这对试图评估预后的研究是有益的。

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