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Date:
2018-02-05
[Abstract] Assays have been developed to study trafficking in various tissues of Caenorhabditis elegans. Adult C. elegans intestinal cells are large and have extensive endocytic networks, thus making them a good system for deciphering the endocytic pathway using live imaging techniques. However, the presence of auto-fluorescent gut granules in adult intestine can interfere with the signals of endocytic compartment reporters, like GFP. Here we demonstrate a protocol adapted from the original method developed by the Grant laboratory to identify signals from reporters in adult intestinal cells. The goal of this protocol is to identify endocytic compartments tagged with fluorescent markers without any confounding effects of background autofluorescent gut granules in adult intestinal ...
[摘要] 已经开发了用于研究线虫的各种组织中的贩运的测定法。 成人 C。 线虫肠细胞很大，具有广泛的内吞网络，因此使它们成为使用实时成像技术破译内吞途径的良好系统。 然而，成年肠道中存在自身荧光的肠道颗粒会干扰吞噬细胞记者的信号，如GFP。 在这里，我们展示了一个协议，从格兰特实验室开发的原始方法改编，以确定记者在成人肠细胞的信号。 该方案的目标是识别标记有荧光标记物的内吞室，而在秀丽隐杆线虫成虫肠细胞中没有背景自发荧光消化道颗粒的混杂效应。
【背景】秀丽隐杆线虫（Caenorhabditis elegans）是一种多细胞生物，已被用于研究内吞运输。最初开发了用于研究内吞的试验。线虫卵母细胞，胚胎和体细胞（清道夫细胞）。简而言之，卵母细胞和胚胎中的测定通过在逗号至1.5倍发育阶段测量肠隔室中含有蛋黄 - 蛋白 - 绿色荧光蛋白报道分子（VIT-2 :: GFP）的区室的强度和大小来进行Grant和Hirsh，1999; Schaheen等人，2006a）。在成年人中，在转基因成虫的体细胞中测量了含有GFP的隔室的强度和大小（从体壁肌细胞分泌进入囊泡并由体细胞胞吞）。表达肌肉myo-3 :: ...
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