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Author:
Date:
2018-04-05
[Abstract] The Rapid Alkalinization Factor (RALF) is a plant hormone peptide that inhibits proton transport causing alkalinization of the extracellular media. To detect the alkalinization response elicited by RALF peptides in root cells, Arabidopsis seedlings are carefully transferred to a gel containing the pH-sensitive indicator bromocresol purple, treated with the peptide and photographed after 30 min. Herein the protocol is optimized for evaluation of exogenous treatment, described in detail and expected results are presented.
[摘要] 快速碱化因子（RALF）是一种植物激素肽，可抑制质子转运，导致细胞外培养基碱化。 为了检测由根细胞中的RALF肽引发的碱化反应，将拟南芥幼苗仔细转移至含有pH敏感指示剂溴甲酚紫紫的凝胶中，用肽处理并在30分钟后拍照。 在此，该方案针对外源性治疗的评估进行了优化，详细描述并呈现预期结果。
【背景】质子运输是由无数的信号引起的，并被植物用来协调增长，防御和发展。一些植物激素肽可以影响质子转运，引起细胞外基质强碱性化（Felix和Boller，1995; Pearce等人，2001a）。 5kDa肽激素快速碱化因子（RALF）在分泌后与其受体FERONIA结合，并导致质膜H + - 腺苷三磷酸酶2的磷酸化，抑制质子转运并碱化细胞外培养基（Pearce等人，2001b; Haruta等人，2014）。
含有pH指示剂溴甲酚紫的生长培养基是在根周围的培养基中观察碱化或酸化的有效方法。先前已经使用该方法来表明NaRALF是调节根毛细胞外pH所需的（Wu等人，2007），并且过表达AtRALF23的植物的根具有降低的将根际酸化的能力（Srivastava ，2009）。 Masachis等人也使用pH指示剂溴甲酚紫紫色的生长培养基。 （2016）证明由真菌病原体产生的RALF同源物诱导了番茄植物根周围的培养基的碱化。
我们已经优化了pH指示剂溴甲酚紫方案，并且使用改进的方案，我们能够在AtRALF1处理后在野生型和突变体幼苗中观察到拟南芥根部周围的碱化作用（Dressano等人， ...
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Date:
2017-12-20
[Abstract] Phloem loading and transport of photoassimilate from photoautotrophic source leaves to heterotrophic sink organs are essential physiological processes that help the disparate organs of a plant function as a single, unified organism. We present three protocols we routinely use in combination with each other to assess (1) the relative rates of sucrose (Suc) loading into the phloem vascular system of mature leaves (Yadav et al., 2017a), (2) the relative rates of carbon loading and transport through the phloem (Yadav et al., 2017b), and (3) the relative rates of carbon unloading into heterotrophic sink organs, specifically roots, after long-distance transport (this protocol). We propose that conducting all three protocols on experimental and control plants provides a ...
[摘要] 来自光合自养源的光合同化物的韧皮部装载和运输到异养宿主器官是必不可少的生理过程，其帮助植物的不同器官作为单一的统一生物体起作用。我们提出了三种方案，我们经常使用它们相互结合来评估（1）蔗糖（Suc）加载到成熟叶片的韧皮部血管系统中的相对比率（Yadav等人，2017a）， （2）通过韧皮部的碳载量和运输的相对速率（Yadav等人，2017b），和（3）碳长期释放到异养池器官特别是根中的相对速率距离传输（这个协议）。我们建议，在实验和对照植物上进行所有三种方案提供了全植物碳分配的可靠比较，并且将与单独进行的单一方案相关联的歧义降至最低（Dasgupta等人，2014; Khadilkar 。，2016）。在该方案中，在源叶片和韧皮部装载和运输14 C标签到异养宿主器官中，[14 C] CO 2 2被光致同化，尤其是根，通过闪烁计数进行量化。使用该协议，我们证明在拟南芥的伴侣细胞中蔗糖转运蛋白和液泡质子泵激焦磷酸酶的过表达增强了14 C标记光合同化物向宿主器官的转运（Dasgupta <等人，2014; Khadilkar等人，2016）。这种方法可以适用于量化其他植物物种的长途运输。
【背景】通过从自养源器官到异养池的韧皮部的长途运输是植物生长和产量的基础。根据其在植物中的作用和位置及其在该地区的主要功能，韧皮部网络通常分为收集韧皮部，运输韧皮部和释放韧皮部（Ayre，2011）。收集韧皮部是糖和其他化合物装入韧皮部以准备运输的地方。在已建立的植物中，收集韧皮部是发生韧皮部负载的成熟，光自养叶子的小脉。我们的第一个伴侣协议（Yadav ...
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