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NalgeneTM 25mm Syringe Filters, 0.2μm

Company: Thermo Fisher Scientific
Catalog#: 725-2520
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Other protocol()

A Quick and Easy Method for Making Competent Escherichia coli Cells for Transformation Using Rubidium Chloride
Author:
Date:
2017-11-05
[Abstract]  This protocol describes a quick and efficient method to make competent E. coli cells for transformation using rubidium chloride. Commercial competent cells are expensive and this protocol provides a cheaper alternative to them. [摘要]  这个协议描述了一个快速有效的方法来做出胜任的E。 使用氯化铷转化大肠杆菌细胞。 商业感受态细胞是昂贵的,这个协议提供了一个更便宜的选择。

【背景】基因克隆的成功高度依赖于细菌细胞的转化效率。 通过用化学物质或电脉冲处理细胞可以人为地提高效率。 有几个协议可用于准备主管的E。 然而,它们通常是长期的,费力的,并且在能力上表现出不一致。 Green和Rogers(2013)的方案克服了这些缺点,并允许制备高感受态细胞(〜10 6 -10 8 CFU /μgDNA)。 虽然其他协议要求细胞在低温(19-22°C)下生长,但该协议涉及在37°C下生长细胞。 因此,与18-24小时相比,细胞生长更快并且在4小时内达到对数期。 该协议是高度可重复的。

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