| Preparation of Synaptoneurosomes to Study the Synapse in the Murine Cerebral Cortex
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Author:
Date:
2021-01-20
[Abstract] The synapse is a complex structure where the transmission of information takes place. Synaptic dysfunction is one of the earliest pathophysiological events in several diseases, such as traumatic brain injury, cerebral ischemia, and neurodegenerative diseases. Thus, a methodology to study synaptic structure and function is crucial for the development of potential strategies for the treatment of many neurological diseases. Synaptoneurosomes (SNs) are structures assembled by the sealed presynaptic bouton and the attached post-synaptic density. Despite the fact that for a long time it has been recognized that SNs are a powerful tool to study synaptic function, composition, and structure, its use has been limited by the requirement of relatively large amounts of material to successfully ...
[摘要] [摘要]突触是一个复杂的结构，在此结构中发生信息的传递。小号ynaptic功能障碍是几种疾病，如脑外伤，脑缺血最早的病理生理活动之一，和神经退行性疾病。因此，研究突触结构和功能的方法学对于开发治疗许多神经系统疾病的潜在策略至关重要。突触神经小体（SN）是由密封的突触前钮扣和附加的突触后密度组装而成的结构。尽管很长一段时间以来，人们已经认识到SN是研究突触功能，组成的强大工具，在结构和结构上，其使用受到成功地隔离它们所需的相对大量材料的限制。在这里，我们描述了在低渗条件下执行的三步离心程序，以从少量大脑皮层中分离出SN。
图形摘要：
突触神经体的制备流程图。
[背景]突触是由连接至突触后终端和突触前布顿组装的结构所包围由星形细胞伸长率（Halassa等人，2007 ）。在过去的十年中，见证了许多用于研究其结构和功能的高度复杂的技术的发展。但是，SN仍被大量研究者所使用，因为它们相对容易分离并产生有关突触结构和功能的有价值的信息。SNs的制备是在特定的低渗条件下进行的改良的细胞分离程序，可分离突触前突突和附着的突触后元件。在鉴定的最初阶段，它们被称为无细胞响应制剂，因为它们对激素具有响应（Chasin等，197 4 ；Horn和Phillipson ，1976 ...
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| Generation of Human Mesenchymal Stem Cell 3D Spheroids Using Low-binding Plates
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Author:
Date:
2018-08-20
[Abstract] The 3D culture of human mesenchymal stem cells (hMSCs) represents a more physiological environment than classical 2D culture and has been used to enhance the MSC secretome or extend cell survival after transplantation. Here we describe a simple and affordable method to generate 3D spheroids of hMSCs by seeding them at high density in a low-binding 96-well plate.
Spheroids of hMSCs cultured in low-binding 96-well plates can be used to study the basic biology of the cells and to generate conditioned media or spheroids to be used in transplantation therapeutic approaches. These MSCs or their secretome can be used as a regenerative therapy and for tissue repair across multiple disease areas, including neurodegeneration.
In comparison to other methods (hanging drop, use ...
[摘要] 人间充质干细胞（hMSC）的3D培养代表比经典2D培养更生理的环境，并且已经用于增强MSC分泌组或移植后延长细胞存活。 在这里，我们描述了一种简单且经济实惠的方法，通过在低密度96孔板中高密度接种hMSC来生成三维球状体。
在低结合96孔板中培养的hMSC的球状体可用于研究细胞的基本生物学并产生用于移植治疗方法的条件培养基或球状体。 这些MSC或其分泌蛋白组可用作再生疗法和用于多个疾病区域的组织修复，包括神经变性。
与其他方法（悬滴，使用凝胶或生物材料，磁悬浮，等）相比，此处描述的方法简单且经济实惠，无需使用专用设备，昂贵材料或复杂试剂。
【背景】 间充质干细胞（MSCs）是开发针对中风或肌萎缩侧索硬化等疾病的新型再生疗法的有吸引力的候选者（Chen et al。，2001; Bang et al。，2005; Boido et al。，2014）。它们的多功能性使得技术的优化和标准化对于确保MSC疗法可以提供尽可能多的益处是必不可少的。使MSC的治疗潜力（例如，增强的抗炎介质分泌）最大化的一种可能方式是以3D方式培养它们（Bartosh ...
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