| Preparing Viable Hippocampal Slices from Adult Mice for the Study of Sharp Wave-ripples
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Author:
Date:
2020-10-05
[Abstract] We describe a protocol for preparing acute brain slices which can produce robust hippocampal sharp wave-ripples (SWRs) in vitro. The protocol is optimized for its simplicity and reliability for the preparation of solutions, slicing, and recovery incubation. Most slices in almost every mouse prepared though the protocol expressed vigorous spontaneous SWRs for ~24 h, compared to the 20-30% viability from "standard" low sodium slicing protocols. SWRs are spontaneous neuronal activity in the hippocampus and are essential for consolidation of episodic memory. Brain slices reliably expressing SWRs are useful for studying memory impairment and brain degeneration diseases in ex vivo experiments. Spontaneous expression of SWRs is sensitive to conditions of slicing and ...
[摘要] [摘要]我们描述了一种制备急性脑切片的方案，该方案可在体外产生强大的海马锐波波纹（SWR）。该协议经过优化，其简单性和可靠性可用于制备溶液，切片和恢复孵育。通过该协议，几乎每只小鼠中的大多数切片都表现出强烈的自发性SWR，持续约24小时，而“标准”低钠切片协议的生存力为20-30％。SWR是海马的自发性神经元活动，对于巩固发作性记忆至关重要。可靠表达SWR的脑片可用于研究离体的记忆障碍和脑退化疾病实验。SWR的自发表达对记录期间的切片和灌注/充氧条件敏感。SWR的振幅和丰度通常用作可行切片的生物标记。关键改进包括快速循环，切片后较长的恢复时间（3-6小时）以及使组织在32岁时恢复°C在充分灌注的培养箱中。我们定制设备中的切片可以表达自发SWR数小时，这表明在本地网络中具有平衡的激发和抑制作用的时间很长。年龄较大的小鼠（约产后180天）的切片显示出与年龄较小的小鼠（产后21-30）相似的生存力。
[背景]急性脑切片已成为电生理学和其他神经科学研究的重要准备。尽管有大量文献描述了脑切片的用法，但通常不那么详细地讨论可靠地生产可行切片的方案。来自年长动物的切片通常不太可行。通常使用健康的细胞形态和神经元的电生理特性来描述脑切片的活力。但是，组织中看起来健康的神经元并不总是转化为正常的网络行为。例如，用标准蔗糖替代方案制备的薄片（例如，Aghajanian和Rasmussen ...
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| Using Seed Chipping to Genotype Maize Kernels
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Author:
Date:
2020-03-20
[Abstract] Zea mays (maize) is an important model organism for studying monocot growth and development. Genotyping maize in the greenhouse or field can be time consuming and costly. Here, we describe a method to remove or chip a small amount of the endosperm from a maize kernel to genotype the kernel prior to planting. The seed chip is removed with a razor blade for DNA extraction and subsequent genotyping. When done correctly, seeds germinate normally and the kernel genotype can be determined before planting thus saving time, money, and field space.
[摘要] [摘要] 玉米玉米（玉米） 是一种重要的模式生物的研究单子叶植物的生长和发育。基因分型玉米中的温室或字段可以是时间消耗和昂贵的。在这里，我们描述了一个方法来去除或芯片一个小数额的的胚乳从一个玉米的内核，以基因型 该内核之前以种植。所述种子芯片被除去与一个剃刀刀片用于DNA 提取和随后的基因分型。当完成正确，种子发芽正常，并在内核基因型可以被确定之前播种从而节省了时间，金钱，和现场的空间。
[背景 ] 玉米是一个农业重要的作物是被种植在整个的世界。它具有许多用途，包括人类消费，动物饲料，和乙醇生产（Ranum 等人，2014） 。玉米是也是一个有用的模型用于研究一个宽范围的生物学问题，包括植物驯化，单子叶植物的生长和发育，病虫害抗性，以及基因组进化（Strable 和斯坎伦，2009） 。尽管玉米有许多科学和工业用途，这是一个大工厂是需要显著空间中任意一个温室或田间到增长。在除了对所述成本的保持一个温室或田间，相当大的努力是需要以执行涉及交叉和收集植物材料用于基因分型和其他分析。由于到这些因素，将能以基因型玉米内核之前以种植是有价值的。这个协议描述的过程的种子碎裂，其中一个小片的胚乳被除去与一个剃刀刀片以被用于对DNA 提取和基因分型。这个协议是一个修饰的一个方法，其中内核是浸泡在水中之前到碎裂（高等人，2008） ...
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