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Parafilm

Company: Interpath
Catalog#: PM996
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Activation of Fibroblast Contractility via Cell-Cell Interactions and Soluble Signals
Author:
Date:
2018-09-20
[Abstract]  The collagen contraction assay is an in vitro, three-dimensional method to determine the factor(s) affecting the contractile behavior of activated cells such as fibroblasts in either physiological or pathological scenarios. The collagen lattices/hydrogels are seeded with fibroblasts to mimic the interactions between these cells and their surrounding extracellular matrix proteins in the connective tissue. This method is an important platform to assess components as potential therapeutic targets to prevent pathologies such as fibrosis, which are manifestations of hyperactivated fibroblasts. We have described a basic version of this collagen contraction assay, which is amenable to customization using different cell types under diverse experimental conditions. [摘要]  胶原收缩测定是体外三维方法,用于确定影响生理或病理场景中活化细胞如成纤维细胞的收缩行为的因子。 胶原蛋白晶格/水凝胶用成纤维细胞接种,以模拟这些细胞与其周围细胞外基质蛋白在结缔组织中的相互作用。 该方法是评估组分作为潜在治疗靶标的重要平台,以预防纤维化等病症,这些病症是过度活化的成纤维细胞的表现。 我们已经描述了这种胶原收缩测定的基本版本,其适于在不同实验条件下使用不同细胞类型进行定制。

【背景】细胞外基质的组织收缩和重塑是许多生理条件(例如伤口愈合)中的基本过程。这两种现象的核心是成纤维细胞,它不仅产生和分泌细胞外基质蛋白,而且还可以通过机械相互作用重组它们。有趣的是,这些细胞行为通常在诸如纤维化的病理条件下被夸大(Desmoulière et al。,2005),从而说明需要理解这些过程的分子调节。虽然人们早就知道,胶原蛋白是细胞外基质的主要成分之一,是组织收缩的主要参与者(Bell et al。,1979),对机械细节的透彻理解。这个过程仍然难以捉摸。对体外成纤维细胞胶原基质体外收缩的研究使研究人员能够识别导致组织收缩的新型运动员(Ngo et al。,2006; Su and Chen, 2015年)。基于该测定,可溶性因子如TGFβ(Levi-Schaffer 等,1999)和免疫细胞(Garbuzenko et al。,2002; ...

Assays for Oxidative Responses of Fusarium graminearum Strains to Superoxide Radicals
Author:
Date:
2018-09-05
[Abstract]  The ascomycete fungus Fusarium graminearum is a major causal agent of Fusarium head blight (FHB), a devastating disease affecting small grains cereals worldwide. To better understand the pathogenesis of this fungus, we provide here an easy-to-use protocol to examine the sensitivity of the wild-type and mutant strains of F. graminearum to oxidative stress from superoxide anions (O2•-) generated by menadione. Similarly, this assay can also be used to detect other stress responses of different fungal strains to various stress agents. The change in stress response of a mutant can offer a clue for the biological function of mutated genes. [摘要]  子囊菌真菌 Fusarium graminearum 是 Fusarium 头枯病(FHB)的主要致病因子,FHB是一种影响全世界小粒谷物的破坏性疾病。 为了更好地了解这种真菌的发病机理,我们在此提供了一种易于使用的方案来检测 F的野生型和突变株的敏感性。 禾谷镰刀菌对由甲萘醌产生的超氧阴离子(O2 • - )的氧化应激。 类似地,该测定也可用于检测不同真菌菌株对各种应激物的其他应激反应。 突变体的应激反应的变化可以为突变基因的生物学功能提供线索。

【背景】子囊菌真菌 Fusarium graminearum (以前也被称为 Gibberella zeae 的性状)不仅是 Fusarium 头枯病和幼苗的主要致病因子小麦和大麦枯萎病,也是玉米赤霉病茎腐病的重要致病因子之一(Dal Bello et al。,2002; Bai and Shaner,2004; Kazan et al。,2012)。除了导致谷物大量减产外,这种真菌还会产生影响人类和动物健康的真菌毒素。因此,这种真菌受到广泛关注,在所有研究的植物病原真菌中排名第四(Dean et al。,2012)。

F。禾本科植物对死有机物进行过冬,特别是对受感染的小粒和玉米作物残留物进行过度研究。为了在如此广泛的环境中生存, F. graminearum ...

Microfluidics-Based Analysis of Contact-dependent Bacterial Interactions
Author:
Date:
2018-08-20
[Abstract]  Bacteria in nature live in complex communities with multiple cell types and spatially-dependent interactions. Studying cells in well-mixed environments such as shaking culture tubes or flasks cannot capture these spatial dynamics, but cells growing in full-fledged biofilms are difficult to observe in real time. We present here a protocol for observing time-resolved, multi-species interactions at single-cell resolution. The protocol involves growing bacterial cells in a near monolayer in a microfluidic device. As a demonstration, we describe in particular observing the dynamic interactions between E. coli and Acinetobacter baylyi. In this case, the protocol is capable of observing both contact-dependent lysis of E. coli by A. baylyi via the Type VI ... [摘要]  自然界中的细菌生活在具有多种细胞类型和空间依赖性相互作用的复杂社区中。 在充分混合的环境中研究细胞,例如摇动培养管或烧瓶,不能捕获这些空间动力学,但是在完全成熟的生物膜中生长的细胞难以实时观察。 我们在这里提出了一种用于观察单细胞分辨率下的时间分辨,多物种相互作用的方案。 该方案涉及在微流体装置中以近单层生长细菌细胞。 作为演示,我们特别描述了观察 E之间的动态相互作用。 大肠杆菌和 Acinetobacter baylyi 。 在这种情况下,该方案能够观察 E的接触依赖性裂解。 大肠杆菌由 A。 baylyi 通过VI型分泌系统(T6SS)和随后的来自 E的基因的功能性水平基因转移(HGT)。 大肠杆菌到 A.baylyi。

【背景】 不同种类细菌之间的空间依赖性相互作用可能在自然界普遍存在,但它们很难观察到。一个例子是通过天然感受的捕食性DNA受体细胞的接触依赖性,原位裂解作为DNA供体的捕食细胞来增强水平基因转移(HGT)。这种情况最近才出现在革兰氏阴性菌中,但已经在多个物种中观察到,并且它被认为是一种相对普遍的现象(Borgeaud et al。,2015; Cooper 等人,,2017; Veening和Blokesch,2017; Ringel et ...

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