| H1N1 Virus Production and Infection
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Author:
Date:
2018-10-20
[Abstract] Influenza A virus is a member of orthomyxoviridae family causing wide-spread infections in human respiratory tract. Mouse infection model is widely used in antiviral research and pathogenesis study against influenza A virus. Here, we report a protocol in infected mice with different virus doses and strains to explore how an inhibitor of lysine-specific demethylase (LSD1) impacts disease progression.
[摘要] 甲型流感病毒是正粘病毒科的成员，在人呼吸道中引起广泛的感染。 小鼠感染模型广泛用于抗甲型流感病毒的抗病毒研究和发病机制研究。 在这里，我们报告了受感染小鼠中具有不同病毒剂量和菌株的方案，以探索赖氨酸特异性去甲基化酶（LSD1）的抑制剂如何影响疾病进展。
【背景】甲型流感病毒是正粘病毒科的一员，是一种负义RNA病毒，具有八个分段的单链病毒RNA（vRNA）基因组，编码10种以上的蛋白质。在过去100年中，流感病毒株的爆发经常出现在人群中，包括1918年由H1N1亚型引起的“西班牙流感”，1957年由H2N2引起的“亚洲流感”，1968年由H3N2引起的“香港流感”， “H1N1流感”于1977年发生的“俄罗斯流感”，以及2009年H1N1流行的“猪流感”（Smith et al。>，2009; Lim and Mahmood，2011; Kumar et al。> ，2018年）。季节性甲型流感病毒也在世界范围内传播，容易在人与人之间传播，每年导致全世界300万至500万人住院（Molinari et al。>，2007）。季节性流感感染每年导致290,000-650,000人死亡，主要是年幼儿童，老年人和重症患者（Kumar et al。>，2018）。
流感病毒研究中使用动物模型不仅可以阐明影响疾病结果的病毒和宿主因素，还可以在易感宿主中传播，还可以评估旨在预防或降低流感发病率和死亡率的干预措施（Thangavel和Bouvier，2014）。在本文中，我们使用两种甲型流感病毒，A ...
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| Preparation of Cerebellum Granule Neurons from Mouse or Rat Pups and Evaluation of Clostridial Neurotoxin Activity and Their Inhibitors by Western Blot and Immunohistochemistry
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Author:
Date:
2018-07-05
[Abstract] Cerebellar Granule Neurons (CGN) from post-natal rodents have been widely used as a model to study neuronal development, physiology and pathology. CGN cultured in vitro maintain the same features displayed in vivo by mature cerebellar granule cells, including the development of a dense neuritic network, neuronal activity, neurotransmitter release and the expression of neuronal protein markers. Moreover, CGN represent a convenient model for the study of Clostridial Neurotoxins (CNT), most notably known as Tetanus and Botulinum neurotoxins, as they abundantly express both CNT receptors and intraneuronal substrates, i.e., Soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor activating protein receptors (SNARE proteins). Here, we describe a protocol for obtaining a highly pure ...
[摘要] 来自产后啮齿动物的小脑颗粒神经元（CGN）已被广泛用作研究神经元发育，生理学和病理学的模型。 CGN体外培养维持成熟小脑颗粒细胞在体内显示的相同特征，包括发育致密的神经炎网络，神经元活动，神经递质释放和神经元的表达 蛋白质标记。 此外，CGN代表了梭菌神经毒素（CNT）研究的便利模型，最着名的是破伤风和肉毒杆菌神经毒素，因为它们大量表达CNT受体和神经元内基质， ie ，可溶性N-乙基马来酰亚胺 - 敏感因子激活蛋白受体（SNARE蛋白）。 在这里，我们描述了从出生后大鼠/小鼠获得高纯度CGN培养物的方案和用CNT中毒的简便方法。 我们还说明了评估CNT活性及其抑制的方便方法。
【背景】梭菌神经毒素（CNT）的大家族由破伤风神经毒素（TeNT）和肉毒杆菌神经毒素（BoNT）的多种变体形成，它们分别是破伤风和肉毒中毒的神经麻痹毒素（Schiavo et al。，2000; Johnson和Montecucco，2008; Rossetto et al。，2014）。 TeNT，七种BoNT血清型（BoNT / A至/ G）及其许多亚型是金属蛋白酶，通过切割SNARE蛋白（可溶性N-乙基马来酰亚胺敏感因子激活蛋白受体），三种必需蛋白质来阻断神经递质的释放而引起神经麻痹。控制突触小泡与突触前质膜的融合（Rossetto et al。，2014; ...
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| Protocols to Study Declarative Memory Formation in Mice and Humans: Optogenetics and Translational Behavioral Approaches
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Author:
Azza Sellami, Alice Shaam Al Abed, Laurent Brayda-Bruno, Nicole Etchamendy, Stéphane Valério, Marie Oulé, Laura Pantaléon, Valérie Lamothe, Mylène Potier, Katy Bernard, Maritza Jabourian, Cyril Herry, Nicole Mons and Aline Marighetto,
Date:
2018-06-20
[Abstract] Declarative memory formation depends on the hippocampus and declines in aging. Two functions of the hippocampus, temporal binding and relational organization (Rawlins and Tsaltas, 1983; Eichenbaum et al., 1992; Cohen et al., 1997), are known to decline in aging (Leal and Yassa, 2015). However, in the literature distinct procedures have been used to study these two functions. Here, we describe the experimental procedures used to investigate how these two processes are related in the formation of declarative memory and how they are compromised in aging (Sellami et al., 2017). First, we studied temporal binding using a one-trial learning procedure: trace fear conditioning. It is classical Pavlovian conditioning requiring temporal binding since a brief temporal gap ...
[摘要] 陈述性记忆的形成取决于海马体和老化程度的下降。已知海马，时间结合和关系组织的两种功能（Rawlins和Tsaltas，1983; Eichenbaum等人，1992; Cohen等人，1997），已知老龄化下降（Leal和Yassa，2015）。但是，在文献中已经使用不同的程序来研究这两个功能。在这里，我们描述了用于研究这两个过程如何与陈述性记忆的形成以及它们如何在衰老中受到损害有关的实验程序（Sellami et。，2017）。首先，我们使用单一试验性学习程序研究了时间绑定：追踪恐惧条件反射。这是经典的巴甫洛夫条件需要时间约束，因为短暂的时间间隔将条件刺激（CS）和无条件刺激（US）呈现分开。我们将追踪恐惧条件程序与光遗传学方法相结合，并且我们表明时间依赖性依赖于背侧（d）CA1活性在时间间隙上的依赖性。然后，我们研究了时间绑定和关系组织之间在声明性记忆形成中的相互作用，这种相互作用使用了小鼠中的两阶段径向迷宫任务及其在人类中的虚拟类比。行为过程包括一个初始学习阶段，在这个阶段中，受试者获得每个手臂持续的奖励/无奖赏价值，然后是测试阶段，其中武器中的奖励突发事件保持不变，但武器重新组合以评估灵活性，陈述性记忆。我们证明了dCA1依赖的时间结合对于记忆的关系组织的发展是必需的，这允许灵活的陈述记忆表达。此外，在衰老过程中，陈述性记忆的退化是由于时间约束能力的减少而阻碍了关系组织。 ...
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