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Author:
Date:
2020-10-20
[Abstract] Induced pluripotent stem cells (iPSCs) are genetically reprogrammed somatic cells that exhibit features identical to those of embryonic stem cells (ESCs). Multiple approaches are available to derive iPSCs, among which the Sendai virus is the most effective at reprogramming different cell types. Here we describe a rapid, efficient, safe, and reliable approach to reprogram human fibroblasts into iPSCs that are compatible with future iPSCs uses such as genome editing and differentiation to a transplantable cell type.
[摘要] [摘要] 诱导多能干细胞（iPSCs）是一种经过基因重组的体细胞，具有与胚胎干细胞（ESCs）相同的特性。有多种方法可以获得iPSCs，其中仙台病毒是最有效的重编程不同的细胞类型。在这里，我们描述了一种快速、高效、安全、可靠的方法，将人类成纤维细胞重新编程为与将来iPSCs相兼容的iPSCs，如基因组编辑和分化为可移植细胞类型。
[背景] 诱导多能干细胞（iPSCs）是经过基因重组的成体细胞，其形态和功能特性与胚胎干细胞（esc）非常相似（Takahashi和Yamanaka，2006；Yu等人，2007）。它们不仅为疾病建模提供了一个很好的机会，而且为涉及组织退化的病理学的治疗策略的发展提供了一个很好的机会。此外，iPSCs的承诺依赖于一个安全的可补充的细胞源，来源于化学定义的培养基中，并且没有随机的DNA整合。
将体细胞重编程为iPSCs需要强制表达支持多潜能状态的转录因子，包括OCT4、SOX2、KLF4、c-MYC、NANOG和LIN-28（Takahashi和Yamanaka，2006；Takahashi等人，2007；Yu等人，2007）。有多种方法可以将转录因子传递到细胞中，包括那些需要整合到宿主染色体中的方法（Takahashi and ...
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Author:
Date:
2020-07-05
[Abstract] Pluripotent stem cells (PSCs) have the potential to provide homogeneous cell populations of T cells that can be grown at a clinical scale and genetically engineered to meet specific clinical needs. OP9-DLL4, a stromal line ectopically expressing the Notch ligand Delta-like 4 (DLL4) is used to support differentiation of PSCs to T-lymphocytes. This article outlines several protocols related to generation of T cells from human and non-human primate (NHP) PSCs, including initial hematopoietic differentiation of PSC on OP9 feeders or defined conditions, followed by coculture of the OP9-DLL4 cells with the PSC-derived hematopoietic progenitors (HPs), leading to efficient differentiation to T lymphocytes. In addition, we describe a protocol for robust T cell generation from hPSCs conditionally ...
[摘要] [摘要] 多能干细胞（PSCs）有潜力提供同质的T细胞群体，这些细胞可以在临床规模上生长，并通过基因工程来满足特定的临床需求。OP9-DLL4是一种异位表达Notch配体Delta-like 4（DLL4）的基质细胞系，用于支持psc向T淋巴细胞的分化。本文概述了从人类和非人类灵长类（NHP）PSC中产生T细胞的几种方法，包括在OP9喂食者或特定条件下对PSC进行初始造血分化，然后将OP9-DLL4细胞与PSC衍生的造血祖细胞（HPs）共培养，从而有效地分化成T淋巴细胞。此外，我们描述了一个从有条件表达ETS1的hPSCs中产生健壮T细胞的方案。所提出的协议提供了一个平台，用于疾病建模和评估其在大型动物模型免疫治疗中的应用。
[背景] T淋巴细胞（T细胞）在细胞介导的免疫反应中起着关键作用，参与肿瘤细胞的监测和杀伤。在过去的几十年里，已经开发了几种策略来重定向、培养和/或增强抗肿瘤的T淋巴细胞（Houot等人，2015年；June等人，2018年），并将其用于基于T细胞的过继免疫治疗。最近的临床试验表明，用嵌合抗原受体（CAR）-T细胞治疗复发性和难治性淋巴瘤患者的疗效显著（Riviere和Sadelain，2017）。
人类多能干细胞（hPSCs），包括胚胎（hESCs）和诱导（hiPSCs），为生产用于过继性细胞免疫疗法的T细胞提供了一种很有前景的资源，可与基因工程技术相结合，产生现成的CAR ...
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