| Magnetic Resonance Imaging and Histopathological Visualization of Human Dural Lymphatic Vessels
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Author:
Date:
2018-04-20
[Abstract] In this protocol, we describe a method to visualize and map dural lymphatic vessels in-vivo using magnetic resonance imaging (MRI) and ex-vivo using histopathological techniques. While MRI protocols for routine imaging of meningeal lymphatics include contrast-enhanced T2-FLAIR and T1-weighted black-blood imaging, a more specific 3D mapping of the lymphatic system can be obtained by administering two distinct gadolinium-based MRI contrast agents on different days (gadofosveset and gadobutrol) and subsequently processing images acquired before and after administration of each type of contrast. In addition, we introduce methods for optimal immunostaining of lymphatic and blood vessel markers in human dura mater ex-vivo.
[摘要] 在该协议中，我们描述了一种使用组织病理学技术使用磁共振成像（MRI）和体外可视化和绘制硬膜淋巴管体内的方法。 虽然用于脑膜淋巴管的常规成像的MRI方案包括对比增强的T2-FLAIR和T1加权的黑血成像，但是可以通过在不同日期施用两种不同的基于钆的MRI造影剂来获得更具体的淋巴系统3D图谱 （gadofosveset和钆布醇）并且随后处理在施用每种类型的对比之前和之后采集的图像。 此外，我们介绍了在人体硬脑膜内进行淋巴和血管标志物最佳免疫染色的方法。
【背景】在大脑免疫特权的原因是没有实质淋巴管。 然而，最近的研究发现了啮齿动物硬脑膜中广泛的淋巴循环系统（Aspelund等人，2015; Louveau等人，2015），提供了可能的途径 用于消除大脑的废物和免疫细胞进入深部颈部淋巴结。 在这个协议中，我们描述了一种方法来：（1）使用MRI的头部显示硬脑膜内的淋巴管体内，和（2）使用优化评估淋巴管的局部存在 免疫染色方法（Absinta等人，2017）。 淋巴管的体内成像可以更详细地研究废物清除和免疫功能的机制及其在各种疾病和衰老中的潜在异常。
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| Primary Cultures from Human GH-secreting or Clinically Non-functioning Pituitary Adenomas
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Author:
Date:
2018-04-05
[Abstract] Pituitary adenomas are among the more frequent intracranial tumors usually treated with both surgical and pharmacological–based on somatostatin and dopamine agonists–approaches. Although mostly benign tumors, the occurrence of invasive behaviors is often detected resulting in poorer prognosis. The use of primary cultures from human pituitary adenomas represented a significant advancement in the knowledge of the mechanisms of their development and in the definition of the determinants of their pharmacological sensitivity. Moreover, recent studies identified also in pituitary adenomas putative tumor stem cells representing, according to the current hypothesis, the real cellular targets to eradicate most malignancies. In this protocol, we describe the procedure to establish primary cultures ...
[摘要] 垂体腺瘤是更常见的颅内肿瘤之一，通常用基于生长抑素和多巴胺激动剂手术的手术和药物治疗。 虽然多为良性肿瘤，但侵入性行为的发生常常被检测到，导致预后较差。 来自人类垂体腺瘤的原代培养物的使用代表了对其发育机制的知识以及其药理敏感性决定因素的定义方面的显着进步。 此外，最近的研究也在垂体腺瘤中发现了假定的肿瘤干细胞，根据目前的假设，它代表了根除大多数恶性肿瘤的真实细胞靶标。 在这个协议中，我们描述了从人垂体腺瘤建立原代培养的程序，以及如何选择，体外扩增和表型鉴定推定的垂体腺瘤干细胞。
【背景】垂体腺瘤是最常见的颅内肿瘤之一（高达15％），横断面研究发现每100,000名居民中约有90例发病，其中绝大多数为30岁以上的成年人。大约10％的未经选择的垂体在尸检时进行了检查（即考虑到之前未诊断为垂体疾病的受试者的垂体）（ ，Molitch，2017）。尽管通常为良性肿瘤，但垂体腺瘤的处理可因与激素分泌过多相关的临床综合征或发展以治疗抗性，高增殖率，快速复发和绒毛外侵袭为特征的侵袭行为而复杂化（Carreno等人，2017）。成年垂体干细胞的持续存在（Florio，2011）导致垂体腺瘤（以及可能的其他良性瘤形成）的发展可以源自具有干细胞特性（主要是自我更新和分化）的肿瘤细胞的亚群能力），正如已经建立的恶性固体和血液肿瘤一样。
最近的实验证据表明，癌症干细胞（CSC）范例也适用于人和小鼠垂体腺瘤（Donangelo等人，2014; ...
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