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Company: Pinservice
Catalog#: 26002-10
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A Method to Injure, Dissect and Image Indirect Flight Muscle of Drosophila
Author:
Date:
2018-05-20
[Abstract]  Inducing an injury specifically to Drosophila flight muscles is a difficult task, owing to the small size of the muscles and the presence of the cuticle. The protocol described below provides an easy and reproducible method to induce injury in the Drosophila flight muscles. [摘要]  由于肌肉尺寸小和角质层的存在,特别针对果蝇飞行肌肉诱导损伤是一项艰巨的任务。 下面描述的方案提供了一种简单且可重复的方法来诱导果蝇飞行肌肉中的损伤。

【背景】脊椎动物的肌肉进行再生,这是一种归因于卫星细胞(即常驻干细胞)的过程。 我们的实验室最近表明,果蝇的肌肉具有与脊椎动物卫星细胞相似的干细胞,即昆虫卫星细胞,并显示对肌肉损伤的增殖反应(Chaturvedi等人,2017年))。 飞蝇遗传学的易用性和我们的诱导伤害的方法为解决再生生物学领域的相关问题提供了机会。 我们已经标准化了一种以更好的精确度损伤背侧纵肌(DLMs)纤维的方案,并且该方法可以用于研究损伤后肌肉中涉及的修复机制。

Dual-sided Voltage-sensitive Dye Imaging of Leech Ganglia
Author:
Date:
2018-03-05
[Abstract]  In this protocol, we introduce an effective method for voltage-sensitive dye (VSD) loading and imaging of leech ganglia as used in Tomina and Wagenaar (2017). Dissection and dye loading procedures are the most critical steps toward successful whole-ganglion VSD imaging. The former entails the removal of the sheath that covers neurons in the segmental ganglion of the leech, which is required for successful dye loading. The latter entails gently flowing a new generation VSD, VF2.1(OMe).H, onto both sides of the ganglion simultaneously using a pair of peristaltic pumps. We expect the described techniques to translate broadly to wide-field VSD imaging in other thin and relatively transparent nervous systems. [摘要]  在这个协议中,我们介绍了一种有效的方法,用于Tomina和Wagenaar(2017)中使用的电压敏感染料(VSD)加载和水蛭神经节成像。 解剖和染料加载程序是成功完成全神经节VSD成像的关键步骤。 前者需要去除覆盖水蛭节段神经节神经元的鞘,这是成功染料加载所需的。 后者需要使用一对蠕动泵同时轻柔地将新一代VSD VF2.1(OMe).H流入神经节的两侧。 我们期望所描述的技术广泛地转化为其他薄且相对透明的神经系统中的宽视场VSD成像。

【背景】双面显微镜是一种宽视野荧光成像系统,由一对精确对准的显微镜组成,用于观察来自对面的神经元制剂并且一次显示不同的焦平面(Tomina and Wagenaar,2017)。通过将该光学系统与新一代电压敏感染料(VSD),VoltageFluor(Miller等人,2012; Woodford等人,2015),荧光可以同时从不同深度的神经元捕获编码具有高保真度膜电压的信号。我们将这种泛神经元记录系统应用于药用水蛭的神经系统,我们利用电生理学方法诱发虚构行为并定量控制可识别神经元的膜电位(Tomina and ...

Live Imaging of Axonal Transport in the Motor Neurons of Drosophila Larvae
Author:
Date:
2017-12-05
[Abstract]  Axonal transport, which is composed of microtubules, motor proteins and a variety of types of cargo, is a prominent feature of neurons. Monitoring these molecular dynamics is important to understand the biological processes of neurons as well as neurodegenerative disorders that are associated with axonal dysfunction. Here, we describe a protocol for monitoring the axonal transport of motor neurons in Drosophila larvae using inverted fluorescence microscopy. [摘要]  由微管,运动蛋白和各种类型的货物组成的轴突运输是神经元的突出特征。 监测这些分子动力学对于了解神经元的生物过程以及与轴突功能障碍相关的神经退行性疾病是重要的。 在这里,我们描述了使用倒置荧光显微镜监测果蝇幼虫中运动神经元的轴突运输的协议。

【背景】轴突是一种独特的神经元结构,神经元通过该结构将电信号和化学信号传递给邻近的神经元,肌肉和其他组织。通过囊泡,细胞器和材料的循环流动或穿梭来维持轴突功能(Liu等人,2012; Wong等人,2012; Alami等人,2014)。轴突功能障碍被认为是神经退行性病变的早期征兆,并且是人类中阿尔茨海默病,帕金森病和运动神经元疾病等神经退行性疾病的原因(Hirokawa等人,2010; Millecamps and Julien,2013)。然而,在人类和哺乳动物模型中难以监测这些神经退行性疾病中的轴突变性过程。果蝇模型是研究分子遗传水平的神经退行性疾病的有力工具,并通过体内神经元的实时成像为治疗方法提供了重要的证据(Shiba-福岛等人,2014; Hosaka等人,2017)。直立荧光显微镜技术通常用于分析组织和器官培养物的活体成像。然而,由于其广泛的实用性和可扩展性,倒置荧光显微镜已经看到需求增加。在这里,我们介绍我们的协议来分析使用倒置荧光显微镜的果蝇的第三龄幼虫的运动神经元的轴突运输。

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