| H1N1 Virus Production and Infection
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Author:
Date:
2018-10-20
[Abstract] Influenza A virus is a member of orthomyxoviridae family causing wide-spread infections in human respiratory tract. Mouse infection model is widely used in antiviral research and pathogenesis study against influenza A virus. Here, we report a protocol in infected mice with different virus doses and strains to explore how an inhibitor of lysine-specific demethylase (LSD1) impacts disease progression.
[摘要] 甲型流感病毒是正粘病毒科的成员，在人呼吸道中引起广泛的感染。 小鼠感染模型广泛用于抗甲型流感病毒的抗病毒研究和发病机制研究。 在这里，我们报告了受感染小鼠中具有不同病毒剂量和菌株的方案，以探索赖氨酸特异性去甲基化酶（LSD1）的抑制剂如何影响疾病进展。
【背景】甲型流感病毒是正粘病毒科的一员，是一种负义RNA病毒，具有八个分段的单链病毒RNA（vRNA）基因组，编码10种以上的蛋白质。在过去100年中，流感病毒株的爆发经常出现在人群中，包括1918年由H1N1亚型引起的“西班牙流感”，1957年由H2N2引起的“亚洲流感”，1968年由H3N2引起的“香港流感”， “H1N1流感”于1977年发生的“俄罗斯流感”，以及2009年H1N1流行的“猪流感”（Smith et al。>，2009; Lim and Mahmood，2011; Kumar et al。> ，2018年）。季节性甲型流感病毒也在世界范围内传播，容易在人与人之间传播，每年导致全世界300万至500万人住院（Molinari et al。>，2007）。季节性流感感染每年导致290,000-650,000人死亡，主要是年幼儿童，老年人和重症患者（Kumar et al。>，2018）。
流感病毒研究中使用动物模型不仅可以阐明影响疾病结果的病毒和宿主因素，还可以在易感宿主中传播，还可以评估旨在预防或降低流感发病率和死亡率的干预措施（Thangavel和Bouvier，2014）。在本文中，我们使用两种甲型流感病毒，A ...
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| Quantification of Neisseria meningitidis Adherence to Human Epithelial Cells by Colony Counting
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Author:
Date:
2018-02-05
[Abstract] To cause an infection, the human specific pathogen Neisseria meningitides must first colonize the nasopharynx. Upon tight interaction with the mucosal epithelium, N. meningitidis may cross the epithelial cellular barrier, reach the bloodstream and cause sepsis and/or meningitis. Since N. meningitidis niche is restricted to humans the availability of relevant animal models to study host-pathogen interactions are limiting. Therefore, most findings that involve N. meningitidis colonization derive from studies using cultured human cell lines. Human epithelial cells have been successfully used to examine and identify molecular effectors involved in initial adherence of the pathogen. Here, we describe a standard protocol to quantify the adherence of N. ...
[摘要] 为了引起感染，人类特定的病原体脑膜炎奈瑟氏脑必须首先在鼻咽中定居。 与粘膜上皮紧密相互作用时， 脑膜炎双球菌可能穿过上皮细胞屏障，到达血流并引起败血症和/或脑膜炎。 由于 N meningitidis niche限于人类。 因此，大多数涉及N 脑膜炎菌群定植来源于使用培养的人类细胞系的研究。 在最初的病原体坚持。 在这里，我们描述了一个标准协议来量化N的遵守情况。 脑膜炎双球菌对上皮细胞FaDu细胞的作用。 感染后收集的细胞裂解物的集落计数用于量化对上皮细胞的粘附。
【背景】作为细菌发病机制的重要一步。细菌粘附素与宿主细胞表面受体之间的分子相互作用决定了定植位点（Soto and Hultgren，1999）。鼻咽中的上皮层形成人类限制性病原体N的第一个细胞屏障。 meningitidis 遇到和无症状殖民。牢固粘附，并与宿主细胞相互作用可导致上皮细胞和进入血液的渗透，在危及生命的败血症和/或脑膜炎（斯蒂芬斯，2009）得到的。从细菌膜延伸出来的长细丝（称为IV型菌毛（Tfp））与PilC1尖端定位的粘附素在初始依从性中起关键作用。脑膜炎到鼻咽上皮细胞（Marceau等，1995; Rudel等，1995）。 Tfp不仅促进与宿主细胞的相互作用，而且参与细菌聚集体的发育，这可以有助于高水平的粘附和抵抗剪切应力（Helaine等，2005，Mikaty ...
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| Live-cell Imaging of Neisseria meningitidis Microcolony Dispersal Induced by Lactate or Other Molecules
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Author:
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2018-01-20
[Abstract] To efficiently colonize the nasopharyngeal epithelium, the human restricted pathogen Neisseria meningitidis follows a multistep adhesion cascade. First, the bacteria adhere to host cells and aggregate into spherical shaped structures called microcolonies. Several hours later, single bacteria start dispersing from the microcolonies and form a monolayer on top of the host cells. Once in proximity to host cells meningococci can adhere tightly to the epithelial surface or become internalized. This can eventually result in invasion of the mucosal surfaces and gain access to the bloodstream, causing a life-threatening disease. Lactate, a metabolite derived from human epithelial cells, has been previously shown to induce rapid dispersal of N. meningitidis from microcolonies. ...
[摘要] 为了有效地定居鼻咽上皮，人类限制性病原体脑膜炎奈瑟氏球菌遵循多步粘附级联。首先，细菌粘附到宿主细胞并聚集成称为微菌落的球形结构。几个小时后，单细菌开始从微菌落分散并在宿主细胞上形成单层。一旦接近宿主细胞，脑膜炎球菌可紧密地粘附在上皮表面或内化。这最终可能导致粘膜表面的侵入并进入血液，导致危及生命的疾病。乳酸是一种来源于人类上皮细胞的代谢物，之前已被证明能诱导N的快速分散。 meningitidis 来自微菌落。在这里，我们描述基于活细胞成像的宿主细胞自由方法来检查宿主来源的乳酸对N的时间的影响。 meningitides microcolony扩散。虽然在这个协议中我们使用乳酸盐，它可以很容易地修改，以测试其他分子的影响。
【背景】ñ。脑膜炎是引起败血症和/或脑膜炎的专性人类病原体。鼻咽上皮的初始附着和随后形成的小菌落是建立感染的第一步。为了导致疾病N。脑膜炎奈瑟球必须穿过鼻咽粘膜上皮屏障，其天然储库，并进入血液（Stephens，2009; ...
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