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10 ml sterile, disposable pipettes

Company: Thermo Fisher Scientific
Catalog#: 4488
Bio-protocol()
Company-protocol()
Other protocol()

Retroviral Capsid Core Stability Assay
Author:
Date:
2018-09-20
[Abstract]  Structural stability of the capsid core is a critical parameter for the productive infection of a cell by a retrovirus. Compromised stability can lead to premature core disassembly, exposure of replication intermediates to cytosolic nucleic acid sensors that can trigger innate antiviral responses, and failure to integrate the proviral genome into the host DNA. Thus, core stability is a critical feature of viral replicative fitness. While there are several well-described techniques to assess viral capsid core stability, most are generally time and labor intensive. Recently, our group compared the relative stability of murine leukemia virus capsid cores using an in vitro detergent-based approach combined with ultracentrifugation against the popular fate of capsid assay. We found ... [摘要]  衣壳核心的结构稳定性是逆转录病毒对细胞的生产性感染的关键参数。受损的稳定性可导致核心过早解体,将复制中间体暴露于细胞溶质核酸传感器,其可触发先天的抗病毒反应,并且不能将原病毒基因组整合到宿主DNA中。因此,核心稳定性是病毒复制适应性的关键特征。虽然有几种充分描述的技术来评估病毒衣壳核心稳定性,但大多数通常是时间和劳动密集型的。最近,我们小组使用基于体外洗涤剂的方法结合超速离心法对衣壳测定的流行命运比较了鼠白血病病毒衣壳核心的相对稳定性。我们发现两种方法都得出了类似的结论,尽管第一种方法是比较显示核心稳定性差异的病毒突变体时评估相对衣壳核心稳定性的一种非常简单和快速的方法。

【背景】逆转录病毒已经进化出复制周期,在规避宿主抗病毒反应方面表现优异。逆转录病毒开发的一种策略是将其复制中间体与胞质核酸传感器如cGAS,TREX1,IFI203和DDX41屏蔽起来(Yan et al。,2010; Gao et al。,2013; Lahaye et al。,2013; Stavrou et al。,2015)。在复制过程中,逆转录病毒在细胞质中产生RNA-DNA杂合体和未甲基化的双链前病毒DNA,这是先天免疫传感器的常见靶标(Yan et al。,2010; Gao et al。,2013; Lahaye et ...

Qualitative in vivo Bioluminescence Imaging
Author:
Date:
2018-09-20
[Abstract]  Bioluminescence imaging (BLI) technology is an advanced method of carrying out molecular imaging on live laboratory animals in vivo. This powerful technique is widely-used in studying a variety of biological processes, and it has been an ideal tool in exploring tumor growth and metastatic spread in real-time. This technique ensures the optimal use of laboratory animal resources, particularly the ethical principle of reduction in animal use, given its non-invasive nature, ensuring that ongoing biological processes can be studied over time in the same animal, without the need to euthanize groups of mice at specific time points. In this protocol, the luciferase imaging technique was developed to study the effect of co-inoculating pericytes (contractile, αSMA+ mesenchymal ... [摘要]  生物发光成像(BLI)技术是一种在体内实验室动物上进行分子成像的先进方法。 这种强大的技术广泛应用于研究各种生物过程,是实时探索肿瘤生长和转移扩散的理想工具。 该技术确保实验室动物资源的最佳利用,特别是减少动物使用的伦理原则,考虑到其非侵入性,确保可以在同一动物中随时间研究正在进行的生物过程,而无需安乐死 小鼠在特定的时间点。 在该方案中,开发了荧光素酶成像技术以研究共同接种周细胞(收缩性,αSMA + 间充质干细胞样细胞,位于微血管内的细胞)对生长和转移性扩散的影响。 卵巢癌使用侵袭性卵巢癌细胞系-OVCAR-5-作为例子。

【背景】生物发光成像(BLI)的原理是基于相对简单的生化过程的发光特性,即,荧光素酶介导的分子底物荧光素氧化产生光。在癌症研究中,BLI是一种流行的工具(Contag et ...

Phagocytosis Assay for α-Synuclein Fibril Uptake by Mouse Primary Microglia
Author:
Date:
2018-09-05
[Abstract]  Microglia are professional phagocytes in the brain and deficiency in their phagocytic activity plays an important role in Parkinson’s disease. This protocol mainly describes the phagocytosis assay for uptake of α-synuclein preformed fibrils, a pathologic form of α-synuclein, by primary microglia. [摘要]  小胶质细胞是大脑中的专业吞噬细胞,其吞噬活性的缺乏在帕金森病中起重要作用。 该方案主要描述了通过原代小胶质细胞摄取α-突触核蛋白预先形成的原纤维(α-突触核蛋白的病理形式)的吞噬作用测定。

【背景】作为大脑的免疫细胞,小胶质细胞在中枢神经系统中起着关键作用。在生理状态下,小胶质细胞不断探索周围环境并参与突触修剪。小胶质细胞可被任何类型的病理事件或脑内稳态的变化激活(Wolf et al。,2017)。激活后,小胶质细胞经历形态学变化,增殖,分泌炎性细胞因子,迁移至病变部位,吞噬病原体,病细胞,碎片,甚至细胞外蛋白质聚集体(Kettenmann et al。,2011; Fu et al。,2014)。 α-突触核蛋白是神经元中的丰富蛋白质,并且是帕金森病中称为路易体和路易神经突的神经元内包涵体的主要成分(Luk 等人,,2012)。最近的研究表明α-突触核蛋白经历细胞间扩散,小胶质细胞是α-突触核蛋白的主要清除剂,它可能承担来自神经元的α-突触核蛋白的负担(Wolf et al。,2017 )。在这里,我们描述了使用人α-突触核蛋白单体产生预先形成的原纤维并通过小胶质细胞吞噬作用测量α-突触核蛋白预先形成的原纤维的摄取的方案(Du et al。,2017)。

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