| Staining and Quantitative Analysis of Myelinating Oligodendrocytes in the Mouse Grey Matter
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Author:
Date:
2020-10-20
[Abstract] Oligodendrocytes generate distinct patterns of myelination throughout the CNS. Variations in myelination along axons may enable neurons to fine-tune conduction velocities and alter signal synchronisation. Here we outline a staining protocol permitting the assessment of the number and length of myelin sheaths formed by oligodendrocyte in the mouse grey matter. This protocol enables the investigation of myelination without the need for reporter mice or technically challenging protocols, aiding the investigation of factors influencing myelin production in the brain.
[摘要] [摘要] 少突胶质细胞在中枢神经系统产生不同的髓鞘形成模式。轴突髓鞘的变化可能使神经元能够微调传导速度和改变信号同步。在这里，我们概述了一个染色方案，允许评估由少突胶质细胞在小鼠灰质中形成的髓鞘的数量和长度。这一方案使研究髓鞘无需报告小鼠或技术上具有挑战性的协议，有助于研究影响大脑髓鞘生成的因素。
[背景] 少突胶质细胞在中枢神经系统（CNS）轴突周围产生绝缘的髓鞘。髓鞘通过鞘间小的无髓鞘间隙处电压依赖性钠通道的浓度加速轴突传导速度——Ranvier节点（Huxley和Stampfli，1949；Rushton，1951；Waxman，1997）。尽管少突胶质细胞遍布中枢神经系统，但并非所有轴突都有髓鞘，这表明髓鞘的形成和大小可能精确地调节动作电位速度和神经元同步性（Pajevic等人，2014）。因此，了解是什么影响少突胶质细胞产生髓鞘的数量（即一个细胞形成的鞘的数量和大小）对于理解髓鞘如何改变神经元功能很重要。
许多技术已经被发展用来分析体内少突胶质细胞的复杂形态。最初，Pio del Rio Hortega的研究使用碳酸银染色法，根据形成的髓鞘的数量和长度来识别和区分少突胶质细胞（Perez ...
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| Isolation, Culture and Differentiation of Adult Hippocampal Precursor Cells
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Author:
Date:
2017-11-05
[Abstract] There are two neurogenic niches in the adult mammalian brain: the subventricular zone of the lateral ventricle and the subgranular zone of the hippocampal dentate gyrus. Cells from these areas can be isolated and maintained in vitro, using two different culture systems to assess their potential regarding proliferation and differentiation in a reductionist model. While the neurosphere assay is primarily performed to directly study the proliferative and differentiation potential of cells in individual brains, the monolayer culture allows single cell analysis in a rather homogeneous cell population. Here, we describe the isolation, culturing methods and differentiation of neural precursor cells in both systems.
[摘要] 成年哺乳动物脑中有两个神经生态位：侧脑室下脑室区和海马齿状回颗粒下区。 来自这些区域的细胞可以在体外分离和维持，使用两种不同的培养系统评估它们在还原模型中的增殖和分化的潜力。 虽然神经球测定主要是为了直接研究个体脑中细胞的增殖和分化潜能，单层培养允许在相当均匀的细胞群中进行单细胞分析。 在这里，我们描述了两个系统中的神经前体细胞的分离，培养方法和分化。
【背景】在哺乳动物脑中，成人神经干细胞存在于两个主要神经生态位中，即海马齿状回（DG）的下颗粒区（SGZ）和室下区（SVZ）的侧脑室，其允许新生神经元成人的大脑。来自神经生态位的神经前体细胞可以在体外分离和培养以模拟细胞过程，尤其是增殖和分化。两种标准培养系统，贴壁单层培养（Palmer等人，1995; Ray等人，1995）和神经球测定（Reynolds和Weiss，1992和1996 ）在20世纪90年代被引入，代表了在体外研究神经祖细胞生物学的有价值的工具。
根据研究问题，每个系统都有其优点和缺点，在选择其中一种或另一种培养方法之前应该仔细考虑。在贴壁单层培养中，细胞生长相当孤立，形成更均匀的培养物。单层允许直接调查和监测单细胞水平的神经前体细胞。受控条件下的形态，增殖和分化等特征可以很容易地分析和可视化。然而，与神经球培养物相比，以单层培养的细胞代表更复杂的模型，因为细胞通常以更少的通常存在于细胞壁中的细胞 ...
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