Plant Assays for Quantifying Ralstonia solanacearum Virulence
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Author:
Date:
2018-09-20
[Abstract] Virulence assays are powerful tools to study microbial pathogenesis in vivo. Good assays track disease development and, coupled with targeted mutagenesis, can identify pathogen virulence factors. Disease development in plants is extremely sensitive to environmental factors such as temperature, atmospheric humidity, and soil water level, so it can be challenging to standardize conditions to achieve consistent results. Here, we present optimized and validated experimental conditions and analysis methods for nine assays that measure specific aspects of virulence in the phytopathogenic bacterium Ralstonia solanacearum, using tomato as the model host plant.
[摘要] 毒力测定是研究体内微生物发病机制的有力工具。 良好的分析跟踪疾病发展,并结合定向诱变,可以识别病原体毒力因子。 植物的疾病发展对环境因素如温度,大气湿度和土壤水位极其敏感,因此标准化条件以获得一致的结果可能具有挑战性。 在这里,我们提出优化和验证的实验条件和分析方法的九个测定,测量植物病原细菌 Ralstonia solanacearum 的毒力的特定方面,使用番茄作为模型宿主植物。
【背景】 Ralstonia solanacearum 是一种土壤传播的细菌,在广泛的植物中引起细菌枯萎,并继续感染全球的新宿主(Hayward,1991; Elphinstone,2005; Wicker et al。 ,2007; Genin,2010; Weibel et al。,2016)。结果, R. solanacearum 是研究最深入的植物致病菌之一(Mansfield et al。,2012)。
R上。 solanacearum 可以长期存在于土壤或水库中(Alvarez et ...
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Induction of Natural Competence in Genetically-modified Lactococcus lactis
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Author:
Date:
2018-07-05
[Abstract] Natural competence can be activated in Lactoccocus lactis subsp lactis and cremoris upon overexpression of ComX, a master regulator of bacterial competence. Herein, we demonstrate a method to activate bacterial competence by regulating the expression of the comX gene by using a nisin-inducible promoter in an L. lactis strain harboring either a chromosomal or plasmid-encoded copy of nisRK. Addition of moderate concentrations of the inducer nisin resulted in concomitant moderate levels of ComX, which led to an optimal transformation rate (1.0 x 10-6 transformants/total cell number/g plasmid DNA). Here, a detailed description of the optimized protocol for competence induction is presented.
[摘要] 在过度表达细菌能力的主要调节因子ComX后,天然能力可以在乳酸乳球菌亚种乳酸和 cremoris 中激活。 在本文中,我们展示了通过在 L中使用乳链菌肽诱导型启动子调节 comX 基因的表达来激活细菌能力的方法。 含有 nisRK 的染色体或质粒编码拷贝的lactis 菌株。 加入中等浓度的诱导剂乳链菌肽导致伴随的中等水平的ComX,其导致最佳转化率(1.0×10 2 sup / -6>转化子/总细胞数/ g质粒DNA)。 在此,提出了用于能力归纳的优化协议的详细描述。
【背景】自然能力是细菌通过专门的摄取机制获得外源DNA的过程,之后内化的DNA整合到其基因组中或作为质粒DNA维持。一些细菌在特定的环境触发因素如基因毒性应激或饥饿时进入能力状态(Seitz和Blokesch,2013; Blokesch,2016)。群体感应系统,如 comCDE 或 comRS ,控制着革兰氏阳性菌的自然能力的激活(Håvarstein et al。,1995; Pestova et al。,1996; Kleerebezem et al。,1997b; Fontaine et al。,2015)。更具体地说, comC 和 comS 编码信息素,而 comD 编码组氨酸激酶和 comE 和 comR 编码响应调节器(Håvarstein et al。,1995; ...
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