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2,5-Dihydroxybenzoic acid

Company: Sigma-Aldrich
Catalog#: 39319
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Analysis of Xyloglucan Composition in Arabidopsis Leaves
Author:
Date:
2017-10-05
[Abstract]  Xyloglucan is one of the main components of the primary cell wall in most species of plants. This protocol describes a method to analyze the composition of the enzyme-accessible and enzyme-inaccessible fractions of xyloglucan in the model species Arabidopsis thaliana. It is based on digestion with an endoglucanase that attacks unsubstituted glucose residues in the backbone. The identities and relative amounts of released xyloglucan fragments are then determined using MALDI-TOF mass spectrometry. [摘要]  木葡聚糖是大多数植物种类中主要细胞壁的主要成分之一。 该方案描述了一种分析拟南芥拟南芥中木葡聚糖的可酶酶和不可酶酶级分的组成的方法。 它是基于内切葡聚糖酶的消化,其攻击骨架中的未取代的葡萄糖残基。 然后使用MALDI-TOF质谱法测定释放的木葡聚糖片段的身份和相对量。
【背景】在许多开花植物中,木葡聚糖是主要细胞壁的主要成分,其在生长调节中起重要作用。顺序提取方案提供了分离不同木葡聚糖结构域的方法(Pauly et al。,1999)。一些木葡聚糖似乎被捕获在纤维素微原纤维内,而另一部分通过氢键结合到它们的表面。木葡聚糖的其余部分(可能大多数)占据了微原纤维之间的距离(Park和Cosgrove,2015)。可以通过细胞壁材料的直接内切葡聚糖酶消化来提取部分后来的木葡聚糖。然后可以通过碱处理释放大部分剩余的木葡聚糖。缺乏木葡聚糖外切糖苷酶的突变体的研究表明,这些酶与葡聚糖内切葡糖基酶/水解酶一起主要作用于酶易接近部分(Sampedro等人,2010;Günl和Pauly,2011;Günl ,2011; Sampedro等人,2012; Sampedro等人,2017)。消化拟南芥木葡聚糖与内切葡聚糖酶攻击未经取代的葡萄糖残基导致三个和四个葡萄糖亚基的混合物,可以通过MALDI-TOF质谱快速和容易地分析(Lerouxel等人, ...

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