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Company: Hettich Instruments

Catalog#: MIKRO220/220R

Determination of Poly(3-hydroxybutyrate) Content in Cyanobacterium Synechocystis sp. PCC 6803 Using Acid Hydrolysis Followed by High-performance Liquid Chromatography

Janine Kaewbai-ngam, Aran Incharoensakdi and Tanakarn Monshupanee

Published online: 2023-08-20

Bio-protocol()

Company-protocol()

Other protocol()

Extraction and Quantification of GABA and Glutamate from Cyanobacterium Synechocystis sp. PCC 6803

Author:

Simab Kanwal and Aran Incharoensakdi,

Date:

2016-09-20

[Abstract] GABA (γ-amino butyric acid) is a biologically active four carbon non-protein amino acid found in prokaryotes and eukaryotes. Glutamate is a five carbon α-amino acid which can be converted to GABA catalyzed by the enzyme glutamate decarboxylase. In this protocol, we describe the procedure for extraction and quantification of GABA and glutamate from cells of the cyanobacterium Synechocystis sp. PCC 6803 (hereafter Synechocystis). Apart from Synechocystis, this protocol has already been successfully tested for the cyanobacterium Nostoc punctiforme and for the green alga Tetraspora sp. CU2551. The protocol can also be used for the analyses of other primary amino acids. We have successfully employed this protocol in our studies of GABA and glutamate ... [摘要] GABA（γ-氨基丁酸）是在原核生物和真核生物中发现的生物活性四碳非蛋白质氨基酸。谷氨酸是一种五碳α-氨基酸，其可以被谷氨酸脱羧酶催化转化为GABA。在该协议中，我们描述了从蓝细菌集胞藻的细胞中提取和定量GABA和谷氨酸的程序。 PCC 6803（以下称为"集胞藻"）。除了集胞藻，该协议已经成功地测试了蓝细菌点状念珠菌和绿藻 Tetraspora CU2551。该方案也可用于其他一级氨基酸的分析。我们已经在我们的集胞藻中的GABA和谷氨酸分析研究中成功地使用该方案（Kanwal和Incharoensakdi，2016）。

[背景] 酸分析先前已通过使用许多方法进行，包括使用薄层色谱或离子交换分离偶联的后柱衍生化与茚三酮方法或也使用HPLC通过荧光检测的检测。然而，在那些检测方法中遇到几个挑战，例如差的灵敏度，衍生物的降解，多重衍生物的形成和更长的保留时间，导致更高的溶剂消耗。此外，由于氨基酸的光学非活性，不能单独使用UV检测方法。
在这里我们描述了提取和分析氨基酸如GABA和谷氨酸在集胞藻中的详细程序。用于氨基酸分离和检测的方法是高性能反相液相色谱，随后是从Henderson等人采用的氨基酸的前柱OPA（邻苯二甲醛）衍生化的UV检测。 ...

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