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Date:
2017-09-05
[Abstract] In this protocol, leaves are cleared and fixed in an ethanol and acetic acid solution, and mounted in Hoyer’s solution. The cleared leaves are imaged under differential interference contrast (DIC) microscope. This protocol is beneficial for studying stomata, hair cells, and other epidermal cells in plants.
[摘要] 在该方案中，将叶子清除并固定在乙醇和乙酸溶液中，并安装在Hoyer溶液中。 清除的叶片在差分干涉对比（DIC）显微镜下成像。 该方案有利于研究植物中的气孔，毛细胞和其他表皮细胞。
【背景】观察气孔和其他表皮细胞如植物叶片表面毛细胞有多种方法。 传统上，将明亮的指甲油或木胶施加到叶子表面并使其干燥。 将叶片剥离并在显微镜下观察。 或者，将透明胶带施加到叶子上并去除以观察叶表面的印记。 这些传统方法可用于坚固的较厚的叶子，但是图像通常不是最高质量的。 小而脆弱的叶如拟南芥叶需要更先进的方法。 还可以在显微镜下直接观察到新鲜的拟南芥或Brachypodium叶。 然而，叶片中的厚度和颜料在观察气孔和其他表皮细胞方面是困难的。 该协议描述了一种清除叶片，用于可视化包括其他表皮细胞在内的气孔的方法，并且获得了在同行评审期刊中出版的优质图像（Anderson，1954）。
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