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Water

Company: Sigma-Aldrich
Catalog#: V270733
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Sterol Analysis in Kluyveromyces lactis
Author:
Date:
2017-09-05
[Abstract]  Sterols are essential lipids of most eukaryotic cells with multiple functions (structural, regulatory and developmental). Sterol profile of yeast cells is often determined during the studies of ergosterol synthesis mutants used to uncover a number of functions for various sterols in yeast cells. Molecular studies of ergosterol biosynthesis have been also employed to identify essential steps in the pathway against which antifungals might be developed. We present here a protocol for the isolation of non-saponifiable lipids (sterols) from Kluyveromyces lactis yeast cells and a chromatographic method for quantitative analysis of sterols in lipid extracts (HPLC) that can be performed in laboratories with standard equipment. [摘要]  甾醇是具有多种功能(结构,调节和发育)的大多数真核细胞的必需脂质。 在用于揭示酵母细胞中各种甾醇的许多功能的麦角甾醇合成突变体的研究期间,酵母细胞的甾醇分布通常被确定。 麦角甾醇生物合成的分子研究也被用于鉴定可能开发抗真菌剂途径的基本步骤。 我们在这里介绍从乳酸克鲁维酵母酵母细胞中分离不皂化脂质(甾醇)的方案和用于在实验室中用标准设备进行的脂质提取物(HPLC)中固醇的定量分析的色谱法。
【背景】在酵母细胞中发现的主要膜固醇的麦角固醇在哺乳动物系统中与胆固醇相似的细胞膜中起着结构的作用。通过影响膜的刚性,流动性和渗透性,甾醇已被证明对膜的许多重要物理特征负责。通过它们与磷脂和鞘脂的相互作用,提出甾醇以维持蛋白质的侧向异质性和质膜中的脂质分布,因为它们在诱导称为脂筏的微区域中的推定作用(Dupont等人,2011; Souza等, 2011)。酵母中的甾醇生物合成是一种能量昂贵的多步需氧过程,需要血红素和分子氧。谷歌甾醇及其生物合成步骤是对宿主生物体胆固醇合成影响较小的抗真菌化合物的主要目标(Daum等,1998)。麦角甾醇及其一些生物合成中间体(角鲨烯,7-脱氢胆固醇)均属于直接吸引人的化学物质。因此,用于甾醇分离的简单可靠的方法是非常有益的(Valachovic和Hapala,2017)。在该方案中,我们描述了用于测定酵母细胞中甾醇分布的固醇分离的分析方法。

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