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TC-324 Heater Controller

Company: Warner Instruments
Catalog#: TC-324
Bio-protocol()
Company-protocol()
Other protocol()

Labelling HaloTag Fusion Proteins with HaloTag Ligand in Living Cells
Author:
Date:
2017-09-05
[Abstract]  HaloTag has been widely used to label proteins in vitro and in vivo (Los et al., 2008). In this protocol, we describe labelling HaloTag-Cbx fusion proteins by HaloTag ligands for live-cell single-molecule imaging (Zhen et al., 2016). [摘要]  HaloTag已广泛用于体外和体内标记蛋白质(Los et al。,2008)。 在本协议中,我们描述了通过HaloTag配体标记HaloTag-Cbx融合蛋白的活细胞单分子成像(Zhen等,2016)。
【背景】生物体的分子过程本质上是动态的。直接观察活细胞中的分子过程对于定量地了解生物系统的功能至关重要。荧光显微镜和荧光标记的最新进展使得能够可视化活细胞中单个单个分子的轨迹,提供有关动态相互作用和生物分子装配的见解(Kusumi等,2014; Liu等,2015; Tatavosian等, 2015; Cuvier和Fierz,2017)。用荧光团对生物分子进行特异性标记是荧光单分子成像的关键。 HaloTag是可以与活细胞中合成染料偶联的自标记标签蛋白(Los et al。,2008)。反应在活细胞中迅速发生,形成的共价键是特异性的和不可逆的。该技术已被用于研究体内遗传信息流,并测定活体哺乳动物细胞中基因调控的动力学(Liu et al。,2015; Zheng and Lavis,2017)。 Janelia FluorTM染料,如Janelia FluorTM ...

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