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Date:
2017-08-20
[Abstract] We analyzed the reactive oxygen species (ROS) accumulation in the colony-forming green microalga Botryococcus braunii in response to several stress inducers such as NaCl, NaHCO3, salicylic acid (SA), methyl jasmonate, and acetic acid. A staining assay using the fluorescent dye CellROX Green was used. CellROX Green is a fluorogenic probe used for measuring oxidative stress in live cells. The dye is weakly fluorescent inside cells in a reduced state but exhibits bright green photostable fluorescence upon oxidation by ROS and subsequent binding to DNA. The large amount of liquid hydrocarbons produced and excreted by B. braunii, creates a highly hydrophobic extracellular environment that makes difficult to study short times defense responses on this microalga. The ...
[摘要] 我们分析了响应于几种胁迫诱导剂如NaCl，NaHCO 3，水杨酸（SA），茉莉酸甲酯和乙酸的菌落形成绿色微藻葡萄球菌中的活性氧（ROS）积累。 使用使用荧光染料CellROX Green的染色测定。 CellROX Green是用于测量活细胞氧化应激的荧光探针。 该染料在细胞内处于弱的荧光，但是在通过ROS氧化并随后与DNA结合时呈现出明亮的绿色光稳定荧光。 由布鲁氏杆菌生产和排泄的大量液体烃产生了高度疏水的细胞外环境，使得难以在该微藻上研究短时间的防御反应。 这里开发的程序允许我们在用不同的应激诱导剂处理细胞后，在短时间内（以分钟为单位），在这种微藻中检测ROS。
【背景】用于检测和定量过氧化氢和其他有机氢过氧化物的第一种方法是使用钛（IV）离子（MacNevin和Urone，1953）。由于钛（IV）的完成导致黄色，通过比色法检测过氧化物分子。该方法用于检测内源性过氧化物，并测定两种梨果实中的过氧化氢酶活性与果实成熟相关（Brennan和Frenkel，1977）。检测脂质氢过氧化物的另一种方法是基于硫代巴比妥酸（TBA），并用于测量诸如牛奶等食品的变质（Sidwell等，1955）。虽然该方法不使用有机溶剂，但是需要对酸化浆料进行蒸汽蒸馏来检测氢过氧化物，并且通过分光光度法定量得到的红色。上述方法具有诸如低灵敏度，与其它化合物的干扰以及可能损坏活细胞的溶剂或物质的使用等缺点。开发了一种更灵敏的方法，其中scopoletin（6-甲基-7-羟基-1,2-苯并吡喃酮）的蓝色荧光在其被过氧化物酶氧化后消失（Andreae，1955; ...
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