KCl

Company: Carl Roth

Catalog#: P017

Detection and Quantification of Calcium Ions in the Endoplasmic Reticulum and Cytoplasm of Cultured Cells Using Fluorescent Reporter Proteins and ImageJ Software

Shunsuke Saito and Kazutoshi Mori

Published online: 2023-08-20

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Preparation of Crude Synaptosomal Fractions from Mouse Brains and Spinal Cords

Author:

Oliver Wirths,

Date:

2017-08-05

[Abstract] The current protocol describes the preparation of crude synaptosomal fractions from mouse brain or spinal cord samples. In detail, a sequential protocol yielding crude synaptosomal and light membrane fractions is provided. This fast and easy method might be sufficient to assess the amount of synaptic proteins in down-steam applications like Western-blot or ELISA in e.g., mouse models of Alzheimer’s disease or other neurodegenerative conditions. [摘要] 目前的方案描述了从小鼠脑或脊髓样品制备粗突触体部分。详细地，提供了产生粗突触体和轻质膜部分的顺序方案。这种快速和容易的方法可能足以在例如阿尔茨海默病或其他神经变性病症的小鼠模型中评估下蒸汽应用中的突触蛋白质的量，例如Western印迹或ELISA。
【背景】分析突触体，代表孤立的突触终端从神经元，可以产生有价值的信息，在不同的神经系统疾病的突触完整性。它们含有在特定条件下脑匀浆后从轴突末端脱离的膜结合区。目前的方案描述了一种快速和简便的浓缩粗突变体级分的方法（见图1）。这些可以用于通过蛋白质印迹定量突触蛋白质，或者可以使用密度梯度离心法进一步纯化以产生高度纯化的突触体亚级分（Gurd等人，1974）。粗突触体部分的制备可能足以评估例如的突触前和突触后蛋白如SNAP25或突触后密度蛋白95（PSD95）的量，例如，具有神经变性表型的小鼠模型（Breyhan等人，2009; Saul and Wirths，2017）。

图1.描述顺序提取过程的流程图

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